单细胞测序技术-.pptx

单细胞测序技术过去二十几年里，随着基因测序技术水平的提高以及千人基因组计划、癌症基因组计划等重大国际合作项目的相继开展，基因组研究日渐被推向高潮。
我们能够得到全基因组序列信息，但是对其进行研究得到的结果只是一群细胞中信号的平均值，或者只代表其中占优势数量的细胞信息，单个细胞独有的特性被忽视。另外有些样品稀少无法在实验室培养，样品量不足以进行全基因组分析，因此全基因组测序遇到难题。
单细胞测序主要涉及单细胞基因组测序和转录组测序两方面，分别针对单个细胞的DNA和RNA进行序列分析和比较，进而揭示基因组和转录组的变化。

优势：
1.测量基因表达水平更加精确；
2.能检测到微量的基因表达子或罕见非编码RNA

需要克服的难题：
1.如何实现均匀扩增；
2.全基因组覆盖问题；
3.较高的扩增效率。
MALBAC技术，首先需要进行5轮MDA预扩增，然后就可以使新获得的扩增产物形成闭合的环状分子。由于这些环状分子不能够被进一步扩增，所以整个扩增过程就变成了线性扩增。然后再进行常规的PCR扩增，由于此时采用的模板更加均一，所以在进行PCR扩增时就不易造成较大的差异。基因组模板DNA第二个要解决的难题，这里是利用Phi29聚合酶能一次在模板上聚合出多个新链的功能来达到这个目的。在5轮的扩增之后，每个模板都会有5*n2个扩增片段，这样就可以保证建库时大多数的基因组区域可以被建成文库，最后可以被测序测到。
MDA方法的技术核心是用Phi29DNA聚合酶来进行直接的扩增，Phi29DNA聚合酶可以把双链DNA进行解链，然后在常温条件下就把原始模板进行大量扩增MDA的特点：
扩增效率更高，实验方法简单
MALBAC的特点：
扩增均一性更好；
得到的扩增DNA的量相对较少，或者说他的扩增效率相对较低应用在有习惯性流产的夫妇当中，最常见的病因就是染色体的平衡易位，所谓染色体平衡易位也就是A染色体的一段移到了B染色体上请大家批评指正！
谢谢！急性中毒的救治中毒的定义中毒的救治特点中毒患者的体检要点中毒患者的处理要点中毒患者病情危重的指标急救处理措施洗胃血液净化用于中毒抢救的指证血液净化的禁忌症有机磷中毒救治的若干问题有机磷中毒的药物治疗（一）有机磷中毒的药物治疗（二）AOPP部分研究进展百草枯中毒救治（一）百草枯中毒救治（二）CO中毒救治的若干问题（一）CO中毒迟发性脑病的临床特点：
部分患者经过积极治疗，意识恢复后，经过2~60天的“假愈期”，突然又出现意识障碍、锥体外系或锥体系为主的脑病变，称为CO中毒迟发性脑病。
迟发性脑病的发病机制尚不完全清楚。
迟发性脑病的发生与CO中毒程度不成比例。治疗：
高压氧疗（HBO）
CO中毒发生6小时之内，尤其是对儿童、怀孕妇女、有神经-精神症状患者、有心肺异常变化的患者应尽早进行高压氧疗。
重复的高压氧疗，是否能减轻患者的神经系统并发症，目前没有很好的随机对照证明。精神类药物中毒的救治若干问题（一）对症治疗要点：
1、低血压：用生理盐水或低分子右旋糖酐静滴，可用去甲肾上腺素或阿拉明
禁用肾上腺素或多巴胺（β受体兴奋加重低血压）
2、室性心律失常：应用利多卡因或苯妥英钠。吩噻嗪类中毒禁用IA抗心律失常药物
3、昏迷：纳洛酮、利他林、美解眠、尼可刹米