分子探针简介5.ppt

分子探针简介分析化学新方法新技术写在前面生物分子探针
离子探针？
什么东东啊？离子探针的生物及化学依据蛋白质三级结构非过渡金属离子（饱和电子层结构）蛋白质及酶的荧光探针免疫荧光技术，即荧光抗体方法，就是把特异性抗原多
次注入动物体，使之产生抗体，将抗体球蛋白从血清中分离
出来，用荧光染料标记，制成荧光标记抗体溶液。免疫荧光
染色比其他的生物染色方法有较高的特异性和灵敏度。抗体（免疫球蛋白）与荧光染料结合后，仍不失抗体的免疫活性，
称为荧光抗体。用于标记抗体的荧光染料于一般的荧光染料
不同，必须容易与抗体球蛋白结合，又不影响其免疫活性；
还要求性能稳定、容易溶解和标记方法简单。由于蛋白质本
身也具有荧光，为了减少蛋白质本身的荧光干扰，标记抗体
的荧光染料不但荧光量子产率高，还要求荧光发射波长较长。
常用的标记抗体的荧光染料有荧光素异硫氰酸酯、四甲基罗
丹明异硫氰酸酯和罗丹明B200等。
核酸分子荧光探针及核酸染色核酸染色剂及荧光探针的应用DNA序列分析中的荧光染料：在电泳分离荧光法检测DNA
序列分析中，通常分四组（A,C,G,T体系）进行，如果用
四种不同的荧光染料为探针,标记一个共同的引物，分别
用在A、C、G、T四个反应体系中，等于用不同的探针
专一地标记了不同的碱基，利用各荧光探针光谱的差别
便可把不同的碱基区分开,因此选择一组四种合适的染料
成为关键，
它们应满足以下条件：
(1)吸收和发射光谱应在可见光区，以降低散射和荧光背景；
(2)各染料的荧光发射波长因该有明显不同，以便区分不同染料;
(3)应有很强的荧光强度，以获得高灵敏度；
(4)不严重干扰引物的杂交作用，使其不影响测序反应效率；
(5)染料的存在不严重改变电泳谱图。表二：菲啶和口丫啶类嵌入剂及其
与DNA结合物的有关性能探针序号探针序号探针序号参考资料谢谢大家！