活化部分凝血活酶时间(APTT)测定.doc

深圳市沙井人民医院检验科文件编号：SJ/QS-26-OP-XY-059版本版次：A/01临床血液作业指导书生效日期：2005.01.01，

活化部分凝血活酶时间测定（APTT）
项目名称:
活化部分凝血活酶时间(ActivatedPartialThromboplastinTime,APTT)
2.检验目的
2.1手术前的检测
2.2DIC的协诊
2.3抗凝药物治疗监测
2.4凝血因子检查
2.5循环血液中抗凝物质和一些疾病协诊等
3.检验原理：
3.1检测原理:全自动血凝仪测定,散射光凝固法检测——确定量的血浆样本（50μl）经过一定时间（3min）温育后，加入部分凝血活酶时间反应试剂（50μl），加温1min，加入0.025MCaCl250μl，加温4min,采用波长660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中的浊度变化,从散射光光强度的测定可得凝集曲线，反应物凝固的时间即活化部分凝血活酶时间。
3.2反应方法学溯源:37℃条件下,以鞣花酸激活因子Ⅻ和Ⅺ,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板,在Ca2+参与下,观察贫血小板血浆凝固所需时间,即为活化部分凝血活酶时间,是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验.
4.性能参数
4.1重复性:CV≤2%
4.2分析和计算参数:报告单位秒(S)
4.3样本量:50ul,试剂量:50ul激活剂,50ulCaCl2
4.4检验时间:在最长检验时间之内测出结果,标准设置最长检验时间:190秒
4.5精密度范围:1.3～6.0%
5．原始样品系统:
血浆
6.容器和添加剂类型
容器采用真空负压专用抗凝管,添加剂类型为0.109M枸橼酸钠
7.试剂及配套品
7.1激活剂:Cephaloplastin试剂(DadeActinActivatedCephaloplastinReagent)
7.1.1商标:德灵(DADEBEHRING)
7.1.2包装规格:10×2ml
7.1.3货号:B4218-1
7.1.4成分:脑磷脂(从干燥兔脑粉中提取)加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.0×10-4M的鞣花酸溶液
7.1.5使用方法:液体试剂,直接使用
7.1.6储存:未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，开盖后2～8℃有效期7天,不能冰冻。未被污染的试剂稳定期是：2～8℃3年、18～25℃1年、37℃2天;
7.2氯化钙溶液(CalciumChlorideSolution)
7.2.1商标:德灵(DADEBEHRING)
7.2.2包装规格:10×15ml
7.2.3货号:ORHO37
7.2.4成分:0.025mol/L的氯化钙溶液
7.2.5使用方法:液体试剂,直接使用.
7.2.6储存:没开盖试剂放2～8℃存放至试剂瓶上有效期.开盖后2～8℃有效期7天.
7.3清洗液(CleanI):用于测定过程中的吸样针冲洗
7.3.1商标:希森美康(Sysmex)
7.3.2包装规格:50ml
7.3.3货号:GSA500A
7.3.4成分:1%次氯酸钠及活性成分
7.3.5使用方法;液体试剂,直接使用
7.3.6储存:没开盖试剂放2～8℃存放至包装有效期,开盖后放于仪器内有效期仅存4小时
7.4校准质控血浆(Ci-Trol)
7.4.1商标:德灵(DADEBEHRING)
7.4.2货号:Level1(Normai),29107010×1ml
Level2(Abnormal),29107110×1ml
Level3(Abnormal),29107210×1ml
7.4.3使用方法:1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用
7.4.4储存:室温:2h,2～8℃:4h,冷冻分装保存:-20℃<2周,-70℃<6个月
8.校准程序:仪器的验证和光路系统校正
仪器的验证由生产商、代理商指定工程师和我科共同完成.灯泡大约半年更换一次,光路系统的校正由代理商完成.
9.程序步骤:
9.1标本采集与要求
9.1.1标本采集:
抽取静脉血1.8ml,加入到含0.2ml109mmol/L(1:9)的枸橼酸钠溶液抗凝真空试管中,并轻轻颠倒10次使之充分混匀,不得有凝块、不得形成泡沫,总量不得超过2.0±0.2ml,并在试管上做好标识.采血应避免溶血和脂血,故患者应尽量空腹和避免在输入脂肪乳过程中或其后8小时内采血.采血后2小时内送到检验科,需要运输时应在低温条件下运输.采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤,外源性凝血因子进入针管,最好不与其它实验一起采集,否则由于标本的分配、分装而使血液停留在针管的时间延长.
9.1.2不合格标本的处理
对凝固、有凝块、严重溶血、重度黄疸、脂血、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的