一种油菜优异种质资源的培育方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113854147A(43)申请公布日2021.12.31(21)申请号202111127292.1(22)申请日2021.09.26(71)申请人贵州省油菜研究所地址550008贵州省贵阳国家高新产业开发区创新路(72)发明人张敏琴韩宏仕(74)专利代理机构北京国坤专利代理事务所(普通合伙)11491代理人张国栋(51)Int.Cl.A01H1/04(2006.01)A01G2/30(2018.01)A01H1/00(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图3页(54)发明名称一种油菜优异种质资源的培育方法(57)摘要本发明属于生物育种技术领域，公开了一种油菜优异种质资源的培育方法，包括：初步筛选具有期望优异性状的品种资源与现有优势组合的甘蓝型油菜为亲本；以甘蓝为砧木，以甘蓝型油菜为接穗，通过斜面插接的方法稼接；接穗成活后开花前套袋自交加代和幼胚挽救，获得第一代变异群体；从第一代变异群体的子代分离群体中筛选变异植株进行再次自交加代和幼胚挽救，获得第三代群体种子；从第三代分离群体中筛选目标性状优良的单株，经小孢子培养获得DH分离群体；从DH分离群体后代中筛选材料，进行倍性鉴定，即可得到油菜优异种质资源。本发明实现了大粒和多粒的兼顾，易于实施，降低了材料成本和人力使用成本。CN113854147ACN113854147A权利要求书1/2页1.一种油菜优异种质资源的培育方法，其特征在于，所述油菜优异种质资源的培育方法包括以下步骤：步骤一，根据育种目标，初步筛选具有期望优异性状的品种资源与现有优势组合的甘蓝型油菜为亲本，比较候选亲本与现有优势亲本的特殊配合力；步骤二，以甘蓝为砧木，以甘蓝型油菜为接穗，通过斜面插接的方法稼接；接穗成活后开花前套袋自交加代和幼胚挽救，获得第一代变异群体；所述以甘蓝为砧木，以甘蓝型油菜为接穗，通过斜面插接的方法稼接包括以下步骤：首先，选择甘蓝为嫁接砧木，在适宜的季节气候和生长条件下，进行甘蓝和甘蓝型油菜的播种；其次，选择甘蓝合适位置用刮胡刀片切去上部，从其中部垂直向下劈8‑10mm开口；随后将甘蓝型油菜接穗株从子叶的位置切断，除去接穗短缩茎基部1‑2片叶；最后，用刀片将该短缩茎斜削成8‑10mm的片状契形，迅速将其插入砧木的劈口之中；用透明保鲜薄膜包扎后，用嫁接夹以垂直方向将其夹紧，用立支架绑扎即可；步骤三，从第一代变异群体的子代分离群体中筛选变异植株再次自交加代和幼胚挽救，获得第三代群体种子；所述从第一代变异群体的子代分离群体中筛选变异植株，包括：(1)田间播种不同株系的第一代种子；(2)待成熟后，每一株系的甘蓝型油菜均选取n1株样本，收获主花序，晾干后考种，考种各株系甘蓝型油菜的角粒重；(3)选择角粒重大的前n2个株系的甘蓝型油菜种子作为变异植株亲本；步骤四，从第三代分离群体中筛选目标性状优良的单株，经小孢子培养获得DH分离群体；步骤五，从DH分离群体后代中筛选农艺性状特征、抗病抗逆性、生育期和含油量目标性状优良及特殊性状突出的材料，进行倍性鉴定，即可得到油菜优异种质资源；所述将筛选出的材料进行倍性鉴定，包括：对获得的甘蓝型油菜单株进行倍性鉴定，考种倍性稳定的四倍体甘蓝型油菜的角粒重；选择抗病性好、经济性质优良、含油量不低于40％且角粒重大的前n3名株系作为甘蓝型油菜的高角粒重株系；将所述甘蓝型油菜的高角粒重株系作为亲本杂交配组或常规品种，通过产量鉴定，得到甘蓝型油菜高产品种。2.如权利要求1所述的油菜优异种质资源的培育方法，其特征在于，步骤一中，所述初步筛选具有期望优异性状的品种资源的方法，包括：用分光光度法大量筛选种质资源，或者利用基因工程技术超量表达关键基因，获得期望优异性状的基础种质。3.如权利要求1所述的油菜优异种质资源的培育方法，其特征在于，步骤二中，所述接穗成活后开花前套袋自交加代，授粉10‑15d后，幼胚挽救。4.如权利要求1所述的油菜优异种质资源的培育方法，其特征在于，步骤二中，所述自交加代为异地加代或本地加代。2CN113854147A权利要求书2/2页5.如权利要求1所述的油菜优异种质资源的培育方法，其特征在于，步骤二中，所述通过幼胚挽救培养基培养的方法进行幼胚挽救。6.如权利要求1所述的油菜优异种质资源的培育方法，其特征在于，所述幼胚挽救培养基按质量份数计，由20‑25份蔗糖、20‑25份肌醇、硝酸钾12‑18份、硝酸铵10‑15份、磷酸二氢钾8‑12份、氯化钙7‑9份、甘氨酸5‑8份、赖氨酸3‑5份、萘乙酸2‑3份、头孢霉素1‑2份、特美汀1‑2份以及1‑2份微量元素组成；所述微量元素按照质量份数由5‑10份硫酸铜、1‑2份硫酸镁以及5‑10份硫酸锌组成。7.如权利要求6所述的油菜优异种质资源的