表面增强拉曼光谱标签的制造方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114127543A(43)申请公布日2022.03.01(21)申请号202080051138.8K·马克(22)申请日2020.07.13(74)专利代理机构北京林达刘知识产权代理事(30)优先权数据务所(普通合伙)1127719192040.42019.08.16EP代理人刘新宇李茂家20163879.82020.03.18EP(51)Int.Cl.62/874,1582019.07.15USG01N21/65(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日G01N21/01(2006.01)2022.01.13(86)PCT国际申请的申请数据PCT/EP2020/0696842020.07.13(87)PCT国际申请的公布数据WO2021/009090EN2021.01.21(71)申请人锡克拜控股有限公司地址瑞士普里利(72)发明人M·E·皮奥特R·H·谢夫勒权利要求书2页说明书28页附图6页(54)发明名称表面增强拉曼光谱标签的制造方法(57)摘要本发明涉及表面增强拉曼光谱(SERS)标签的制造方法的领域。根据本发明的制造方法为可重复的和通用的，并且能够以方便的方式制造大量的SERS标签，其特征在于窄的尺寸分布和高比例的低数目聚集体。通过本文记载的本发明的制造方法制造的SERS标签提供了增加的整体SERS响应。CN114127543ACN114127543A权利要求书1/2页1.一种表面增强拉曼光谱(SERS)标签的制造方法，其包括以下步骤：a)提供第一胶体，所述第一胶体基本上由分散在水性溶剂中的具有等离子体表面和基本上相同尺寸的纳米颗粒、以及吸附在所述纳米颗粒的表面上的稳定剂组成，并且所述第一胶体的ζ电位值低于或等于‑25mV；b)提供第二胶体，所述第二胶体基本上由分散在水性溶剂中的具有等离子体表面和基本上相同尺寸的纳米颗粒、吸附在所述纳米颗粒的表面上的拉曼活性报告分子、以及吸附在所述纳米颗粒的表面上的稳定剂组成，并且所述第二胶体的ζ电位值低于或等于‑25mV；c)将所述第一胶体与所述第二胶体结合，使得所述第一胶体的纳米颗粒的数目与所述第二胶体的纳米颗粒的数目之比在约25：1至约1：1之间，优选约5：1至约1：1，以提供第三胶体；d)通过步骤d1)–d3)中任一步或其组合诱导纳米颗粒的聚集：d1)在介于约2.2和所述拉曼活性报告分子的净电荷在0～0.3之间的最低pH值之间的pH下，将步骤c)中获得的所述第三胶体混合；d2)向步骤c)中获得的所述第三胶体中添加盐溶液、优选无机盐溶液；d3)向步骤c)中获得的所述第三胶体中添加水混溶性溶剂；和e)停止聚集。2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b)包括依照b1)～b3)的顺序进行的以下步骤：b1)提供胶体，所述胶体基本上由分散在水性溶剂中的具有等离子体表面和基本上相同尺寸的纳米颗粒、以及吸附在所述纳米颗粒的表面上的稳定剂组成，并且所述胶体的ζ电位值低于或等于‑25mV；b2)将所述胶体的pH调节至比吸附在所述纳米颗粒的表面上的所述拉曼活性报告分子不携带净电荷的最低pH值更高的值，同时保持所述ζ电位值低于或等于‑25mV，优选低于‑40mV；和b3)向步骤b2)中获得的胶体中添加所述拉曼活性报告分子在溶剂中的溶液，同时保持所述ζ电位值低于或等于‑25mV。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述稳定剂选自羧酸、羧酸盐、磷酸、磷酸盐、抗坏血酸、抗坏血酸盐、及其混合物。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述第二胶体的所述纳米颗粒在它们的表面上已经吸附了拉曼活性报告分子的亚单层或单层。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中在步骤b3)中，所述拉曼活性报告分子在溶剂中的溶液包括两种以上的不同的拉曼活性报告分子的混合物。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中在步骤c)中，所述第一胶体的纳米颗粒的数目与所述第二胶体的纳米颗粒的数目之比在约4：1和约3：1之间。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中步骤d1)进一步包括在混合的同时，向步骤c)中获得的所述第三胶体添加酸溶液，使得所得胶体的pH值介于约2.2和所述拉曼活性报告分子的净电荷在0～0.3之间的最低pH值之间。8.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中调节所述第一胶体的pH使得步骤d1)中获得的所述第三胶体的pH介于约2.2和所述拉曼活性报告分子的净电荷在0～0.3之间的最低pH值之间。2CN114127543A权利要求书2/2页9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中步骤e)包括以下步骤e1)‑e4)中任一步：e1)将步骤d)中获得的胶体的pH调节至比吸附在所述纳米颗粒的表面上的所述拉曼活性报告