载蛋白质类药物的PLGA复合微球及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102727899A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102727899A(43)申请公布日2012.10.17(21)申请号201210119696.0(22)申请日2012.04.20(71)申请人中山大学附属第三医院地址510630广东省广州市天河区天河路600号中山大学附属第三医院(72)发明人张永明罗宇燕李姝瑾(74)专利代理机构广州华进联合专利商标代理有限公司44224代理人万志香(51)Int.Cl.A61K47/36(2006.01)A61K47/34(2006.01)A61K47/04(2006.01)A61K38/21(2006.01)A61K38/38(2006.01)A61K9/19(2006.01)权利要求书权利要求书2页2页说明书说明书88页页附图附图33页(54)发明名称载蛋白质类药物的PLGA复合微球及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种载蛋白质类药物的PLGA复合微球及其制备方法，其采用改良复乳-溶剂挥发法，即在复乳法的基础上，应用海藻酸钠与钙离子螯合形成缓释凝胶的原理，以PLGA为微球载体，冻干注射用重组人干扰素-α、牛血清白蛋白等为包裹对象，制备载药微球。其形态圆整，粒度分布均匀，平均粒径分布在70微米左右，载药量为0.6％以上，包封率可达50％左右，体外释药性能符合长效制剂特征。CN102789ACN102727899A权利要求书1/2页1.一种载蛋白质类药物的PLGA复合微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)PLGA溶液的配制将PLGA溶解于有机溶液中形成有机相，PLGA的浓度为10％～25％(g/ml)；(2)含蛋白质类药物的海藻酸钠溶液的配制将蛋白质类药物溶解于含稳定剂的海藻酸钠溶液中形成内水相，蛋白质类药物的浓度为0.5％～10％(g/ml)，稳定剂的浓度为0.1％～5％(g/ml)；海藻酸钠的浓度为0.1％～5％(g/ml)；(3)初乳的制备将内水相注射进有机相中形成初乳，有机相与内水相的体积比为4∶1～50∶1；(4)复乳的制备把初乳在搅拌的情况下加到外水相1中，乳化形成复乳；所述外水相1为含一定浓度乳化剂的CaCl2水溶液，初乳与外水相1的体积比为1∶10～1∶100；乳化剂的浓度为0.2％～5％(g/ml)，CaCl2浓度为0.1％～10％(g/ml)；(5)微球的形成将复乳溶液转移到外水相2中，低速搅拌至有机溶剂挥发完全，离心、洗涤后收集微球；所述外水相2为CaCl2溶液或含乳化剂的CaCl2溶液，其中，CaCl2浓度为0.1％～10％(g/ml)，乳化剂浓度为0.05％～5％(g/ml)，外水相2的体积为复乳的0.8～8倍；(6)冷冻干燥，即得载蛋白质类药物的PLGA复合微球。2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述蛋白质类药物为重组人干扰素-α或牛血清白蛋白。3.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中，PLGA的浓度为15％～20％(g/ml)；所述有机溶液为二氯甲烷。4.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，步骤(2)中，蛋白质类药物的浓度为1％～5％(g/ml)，稳定剂的浓度为0.5％～2.5％(g/ml)；海藻酸钠的浓度为0.5％～2.0％(g/ml)。5.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，步骤（3）中，有机相与内水相的体积比为10:1～15:1；乳化速度为3000～20000rpm，乳化时间为1～10分钟。6.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，步骤（4）中，初乳与外水相1的体积比为1:15～1:75；乳化剂溶液的浓度为0.2%～3%（g/ml），CaCl2水溶液的浓度为0.5%～4%（g/ml）；复乳形成的搅拌速度为1000～3000rpm，乳化时间为5～20分钟。7.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，步骤（5）中，外水相2中，CaCl2浓度为0.5%～4%（g/ml），乳化剂浓度为0.1%～3%（g/ml）；外水相2的体积为复乳的3～8倍；搅拌速度为200～2000rpm，离心速度为500～5000rpm，离心时间为5～20分钟，洗涤次数为2～6次。8.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的蛋白质类药物的稳定剂为泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、吐温20、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油或明胶。9.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征在于，所述的外水相1和外水相2中的乳化剂为聚乙烯醇、聚乙二醇1000、明胶、吐温20或者聚乙烯吡咯烷酮。10.根据权利要求1或2述制备方法，其特征在于，所制微球进行冷冻干燥的条件2CN102727899A权利要求书2/2页为：-15℃,48h；-25℃,36h；-50℃，24h；或-5