防治植物青枯病和根肿病的生防制剂及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102757917A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102757917A(43)申请公布日2012.10.31(21)申请号201210254827.6(51)Int.Cl.(22)申请日2012.07.20C12N1/20(2006.01)A01N63/00(2006.01)(66)本国优先权数据A01P1/00(2006.01)201110446456.72011.12.28CNA01P3/00(2006.01)(83)生物保藏信息C12R1/07(2006.01)CCTCCNO:M2091452009.07.13(71)申请人浙江大学地址310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号(72)发明人周青谢关林苏婷刘宝平朱勃李斌(74)专利代理机构杭州天勤知识产权代理有限公司33224代理人胡红娟权利要求书权利要求书1页1页说明书说明书99页页附图附图44页(54)发明名称防治植物青枯病和根肿病的生防制剂及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种防治植物青枯病和根肿病的生防制剂及其制备方法和应用。该生防制剂的制备方法包括：将经活化的解淀粉芽孢杆菌ZJUB2008接种到培养液中，于25-45℃发酵培养6-120h；其中，以体积1L计，所述的培养液含有以下组分：蛋白胨3-15g，牛肉浸膏0-3g，葡萄糖0-5g，酵母粉0-5g，NaCl0-8g，余量为水；培养液的pH为5.5-9.0。本发明利用解淀粉芽孢杆菌ZJUB2008在适宜发酵培养基和培养条件下通过微生物发酵制备生防制剂，所制得的生防制剂对不同生化型的青枯菌和根肿菌均有较好防效，能显著降低青枯病和根肿病的病害发生率和病情严重度，适合规模化生产。CN102759ACN102757917A权利要求书1/1页1.一种生防制剂的制备方法，包括：将经活化的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZJUB2008接种到培养液中，于25-45℃发酵培养6-120h；其中，所述解淀粉芽孢杆菌ZJUB2008的保藏号为CCTCCNO：M209145；以体积1L计，所述的培养液含有以下组分：蛋白胨3-15g，牛肉浸膏0-3g，葡萄糖0-5g，酵母粉0-5g，NaCl0-8g，余量为水；培养液的pH为5.5-9.0。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，以体积1L计，所述的培养液含有以下组分：蛋白胨10-15g，牛肉浸膏1-3g，葡萄糖0-1g，酵母粉0-3g，NaCl6-8g，余量为水；培养液的pH为7.5-8.0。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的接种为：将解淀粉芽孢杆菌ZJUB2008接种到种子培养液中，培养获得浓度为108-109CFU/ml的种子液，将种子液接种到所述的培养液中，接种量以体积百分比浓度计为1-3％。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的发酵培养温度为35-40℃。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的发酵培养时间为24-48h。6.一种采用如权利要求1-5任一所述的制备方法制得的生防制剂。7.如权利要求6所述的生防制剂在防治植物青枯病中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的植物为番茄、茄子、马铃薯或生姜。9.如权利要求6所述的生防制剂在防治植物根肿病中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的植物为十字花科植物。2CN102757917A说明书1/9页防治植物青枯病和根肿病的生防制剂及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及植物病害防治领域，尤其涉及一种防治植物青枯病和根肿病的生防制剂及其制备方法和应用。背景技术[0002]作物细菌性青枯病是由青枯劳尔氏菌(Ralstoniasolanacearum)引起的一种系统侵染的毁灭性土传病害，俗称“植物瘟病”。青枯劳尔氏菌寄主广泛，可侵染44个科的数百种植物。目前，细菌性青枯病的防治是世界公认的一大难题，它广泛分布于世界各地，在我国南方省市发生严重，尤其在浙江，近年来不但茄科、瓜类受害，大面积发生的桑青枯病更对蚕业生产造成严重损失。[0003]我国从20世纪90年代开始进行青枯病的生物防治制剂研究，何礼远和康耀卫等利用青枯菌无毒菌株和荧光假单胞菌诱导花生产生抗病性(何礼远，康耀卫.利用青枯菌无毒菌株和荧光假单胞菌诱导花生产生抗病性.植物保护学报，1990，17(2)：113-116)，杨合同等利用芽孢杆菌防治生姜青枯病取得了较好的效果(杨合同，庞定远，任欣正.姜瘟病生物防治试验初报.山东科学，1990，3(4)：42-46)。但国内外现有生防制剂均为单一的活菌体，只针对某一生化型。而Hayward根据青枯菌对乳糖、麦芽糖、纤维二糖和甘露醇、甜醇、山梨醇