一种以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105331667A(43)申请公布日2016.02.17(21)申请号201510934519.1(22)申请日2015.12.15(71)申请人石河子大学地址832000新疆维吾尔自治区石河子市北四路221号申请人新疆绿翔牧业有限责任公司(72)发明人卢士玲黄超郝玉兰王斌姬华张杰张燕丽(74)专利代理机构石河子恒智专利商标代理事务所(普通合伙)65102代理人李靖(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)权利要求书2页说明书9页(54)发明名称一种以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法(57)摘要本发明公开了一种以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于主要包括如下步骤：a、原料准备：选取600g的血红蛋白粗制品，加水稀释到浓度为5％～6％；b、一次酶解：加入100～150g的风味蛋白酶，pH＝6.5～7.5，温度50～55℃环境下，水解4.5～5.5h；c、降温：一次酶解后，将温度将为至43～46℃，pH调节至8.5～9.5；d、二次酶解：加入60～70g的碱性蛋白酶，酶解4.5～5.5h；e：高温灭酶：水浴灭酶10～20分钟；f、离心：弃去沉淀，得到上清液，并冷冻干燥得到血红蛋白多肽。与现有技术相比，本发明具有生产工艺简单，制备出的多肽产品具有富含血红素、苦味值较低等特点。CN105331667ACN105331667A权利要求书1/2页1.一种以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于主要包括如下步骤：a、原料准备：选取600g的血红蛋白粗制品，加水稀释到浓度为5％～6％；b、一次酶解：在a步骤的原料中加入100～150g的风味蛋白酶，pH＝6.5～7.5，温度50～55℃环境下，水解4.5～5.5h；c、降温：一次酶解后，将温度将为至43～46℃，pH调节至8.5～9.5；d、二次酶解：加入60～70g的碱性蛋白酶，酶解4.5～5.5h；e：高温灭酶：水浴灭酶10～20分钟；f、离心：离心后弃去沉淀，得到上清液，为牛血红蛋白酶解液；g、冷冻干燥：将f步骤得到的上清液冷冻干燥，即得到血红蛋白多肽。2.如权利要求1所述的以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于：上述风味蛋白酶为20000～25000U/g。3.如权利要求1或2所述的以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于：上述碱性蛋白酶为40000～50000U/g。4.如权利要求1或2所述的以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于：上述离心在2000～4000r/min转速下离心5～15min。5.如权利要求1或2所述的以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于：上述a步骤的血红蛋白粗制品使用如下方法制备：选用新鲜牛血和抗凝剂，抗凝剂和鲜牛血按照1：5～7的比例混合后过滤，过滤后的血液在2500～3500r/min下一次离心10～20min后，弃去上清液，收集下层红细胞，将收集的红细胞用4～6体积冷生理盐水，洗涤1～4次，之后进行超声波破碎，超声波破碎时加入0.1％～0.2％NaHSO3，加适当体积的水，放入超声波细胞破碎机中超声破碎一定时间，得到破碎的红细胞溶液，将得到的红细胞溶液在7000r～9000/min下二次离心25～35min，弃去下层细胞碎片，将血红蛋白溶液装入透析袋中，置于流动自来水中透析8～12h，之后在50～60℃恒温下水浴8～12h，最后冷冻干燥得到血红蛋白粗制品，所述抗凝剂包含：柠檬酸40～55g，柠檬酸钠100～150g，葡萄糖100～170g，加水100g。6.如权利要求3所述的以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于：上述a步骤的血红蛋白粗制品使用如下方法制备：选用新鲜牛血和抗凝剂，抗凝剂和鲜牛血按照1：5～7的比例混合后过滤，过滤后的血液在2500～3500r/min下一次离心10～20min后，弃去上清液，收集下层红细胞，将收集的红细胞用4～6体积冷生理盐水，洗涤1～4次，之后进行超声波破碎，超声波破碎时加入0.1％～0.2％NaHSO3，加适当体积的水，放入超声波细胞破碎机中超声破碎一定时间，得到破碎的红细胞溶液，将得到的红细胞溶液在7000r～9000/min下二次离心25～35min，弃去下层细胞碎片，将血红蛋白溶液装入透析袋中，置于流动自来水中透析8～12h，之后在50～60℃恒温下水浴8～12h，最后冷冻干燥得到血红蛋白粗制品，所述抗凝剂包含：柠檬酸40～55g，柠檬酸钠100～150g，葡萄糖100～170g，加水100g。7.如权利要求4所述的以牛血红蛋白为原料制备血红蛋白多肽的方法，其特征在于：上述a步骤的血红蛋白粗制品使用如下方法制备：选用新鲜