一种直接测定甘油三酯Sn‑2位棕榈酸含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106053650A(43)申请公布日2016.10.26(21)申请号201610412833.8(22)申请日2016.06.13(71)申请人北京三元食品股份有限公司地址100163北京市大兴区瀛海瀛昌街8号(72)发明人陈历俊张明辉乔为仓姜铁民周伟明(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书9页附图1页(54)发明名称一种直接测定甘油三酯Sn-2位棕榈酸含量的方法(57)摘要本发明涉及一种直接测定甘油三酯Sn-2位棕榈酸含量的方法，采用GC-MS法进行检测，样品前处理包括利用盐酸-甲醇溶液对脂肪酸及分离的Sn-2位单甘脂进行甲酯化反应，利用C16:0甲酯峰面积相对含量比值计算出Sn-2位棕榈酸的绝对含量。本发明方法前处理操作简单，对样本含水量没有要求，缩短了前处理时间，提高了样品回收率。可直接测定Sn-2位棕榈酸含量，计算方法简单。可以应用到豆粉、奶粉、牛奶、母乳，奶油，酸奶及其他乳制品中。CN106053650ACN106053650A权利要求书1/1页1.一种直接测定甘油三酯Sn-2位棕榈酸含量的方法，其特征在于，采用GC-MS法进行检测，其中样品前处理包括利用盐酸-甲醇溶液对试样进行甲酯化反应。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述试样包括待测样品、待测样品水解后的脂肪溶液、待测样品中分离的Sn-2位单甘油酯。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐酸-甲醇溶液中盐酸浓度为0.5-3mol/L，优选为0.5mol/L。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，GC-MS法检测条件如下：GC：进样器：ThermoScientificTriPlusRSH自动进样器；色谱柱：HP-88气相色谱柱(100m×0.250mm,0.20μm)；进样口温度：200℃；恒流速模式：1mL/min；进样量：1μL；分流比：10:1；载气：N2；柱温箱升温程序如下：MS：电子轰击离子源：EI；scan模式；离子源温度：280℃；传输线温度：240℃；四级杆质量扫描范围：35-400amu；溶剂延迟10min。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品包括豆粉、奶粉、牛奶、母乳，奶油，酸奶。6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)从待测样品中提取脂肪，用猪胰酯酶水解，将水解后的脂肪溶液过氨基固相萃取柱分离得Sn-2位单甘油酯；2)用盐酸-甲醇溶液分别对所述水解后的脂肪溶液和Sn-2位单甘油酯进行甲酯化反应，然后进行GC-MS检测；根据峰面积获得Sn-2位棕榈酸占总棕榈酸百分含量；3)将待测样品用盐酸-甲醇溶液进行甲酯化反应，按照与步骤2)相同的条件进行GC-MS检测，按照外标法获得待测样品中总棕榈酸含量；计算获得待测样品中Sn-2位棕榈酸含量。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述从待测样品中提取脂肪的方法包括：取待测样品，加入适量氨水调节呈碱性，转移至分液漏斗中，加乙醇摇匀；分2次加入乙醚，摇匀；加入石油醚，振荡；静置直至上层溶液澄清；重复以上步骤提取数次，将醚溶液合并，在氮气保护下45℃旋转蒸发至干，得待测脂肪。8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述用氨基固相萃取柱分离Sn-2位单甘油酯的方法包括将所述水解后的脂肪溶液加入到用正己烷活化的氨基固相萃取柱中，弃去流出液；用正己烷-乙酸乙酯淋洗液(v/v＝85:15)淋洗，弃去流出液；用二氯甲烷-甲醇洗脱液(v/v＝2:1)洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，即得。9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述甲酯化反应的方法包括：向待测试样中加入盐酸-甲醇溶液，加入正己烷和甲醇，振荡混匀，在80℃下恒温水浴振荡，取出试管用流动水冷却至室温后，加入去离子水，冷冻离心。2CN106053650A说明书1/9页一种直接测定甘油三酯Sn-2位棕榈酸含量的方法技术领域[0001]本发明属于化学分析技术领域，具体涉及一种直接测定甘油三酯Sn-2位棕榈酸含量的方法。背景技术[0002]脂肪在婴儿成长发育中起重要作用，母乳和婴儿配方奶粉中脂肪的含量虽然只占总重量的3-4％，但却为正值成长发育阶段的婴儿提供50-60％的能量，同时对于多种维他命和矿物质的吸收有着关键性的作用。[0003]棕榈酸(饱和脂肪酸-C16:0)是母乳中大量存在的饱和脂肪酸的其中一种。食物当中的脂肪是由脂肪酸构成，并以三种形式存在于自然界中：饱和脂肪酸，单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。母乳和婴儿配方奶粉中的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸是连在三叉形的甘油