一种抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106701833A(43)申请公布日2017.05.24(21)申请号201510797096.3(22)申请日2015.11.18(83)生物保藏信息CGMCCNo.100622014.11.26(71)申请人光明乳业股份有限公司地址201103上海市闵行区吴中路578号(72)发明人吴正钧高彩霞刘振民韩瑨徐晓芬(74)专利代理机构上海弼兴律师事务所31283代理人朱水平沈利(51)Int.Cl.C12P1/04(2006.01)C12R1/01(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图5页(54)发明名称一种抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物(57)摘要本发明提供了一种抑菌的类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)发酵液提取物。该抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物是由包括下述步骤的方法所制得的：在牛乳中培养多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)CGMCCNo.10062，收集发酵液的上清液即得。本发明所提供的多粘类芽孢杆菌所产生的抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物对酸碱和温度不敏感，并具有广谱和高效的抑菌效果，可有效抑制或杀死病原菌。CN106701833ACN106701833A权利要求书1/1页1.一种抑菌的类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)发酵液提取物，其特征在于，其由包括下述步骤的方法制得：在牛乳中发酵多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)CGMCCNo.10062，收集发酵液的上清液即得。2.如权利要求1所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述牛乳为全脂牛乳和/或脱脂牛乳。3.如权利要求1所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述牛乳的固形物含量为2-15％，所述百分比为所述固形物的质量占所述牛乳的体积的质量体积百分比。4.如权利要求1所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述发酵的温度为25-35℃；和/或，所述发酵的时间为1-7天；和/或，所述发酵为振荡培养。5.如权利要求4所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述振荡培养的转速为180转/分钟。6.如权利要求1所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述收集发酵液的上清液包括以下步骤：将所述发酵液中的多粘类芽孢杆菌CGMCCNo.10062灭活、离心，收集上清液；所述灭活较佳地为在50-80℃下水浴5-15min；所述冷却较佳地为冷却至室温；所述离心较佳地为9000r/min离心25min。7.如权利要求1所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：向所述发酵液的上清液中加入盐进行沉淀、离心，收集沉淀物；所述盐较佳地为硫酸铵；所述沉淀的时间较佳地为4-24小时；所述盐的终饱和度较佳地为40-90％，所述百分比为所述盐的质量占所述上清液和盐的总体积的质量体积百分比。8.如权利要求7所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述方法还包括以下步骤：纯化所述沉淀物，所述纯化在所述收集沉淀物后进行；所述纯化较佳地包括以下步骤：重悬所述沉淀物、透析、过凝胶过滤层析，即得。9.如权利要求8所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述重悬为使用超纯水重悬；和/或，所述透析的透析袋的截留分子量为3500道尔顿和1000道尔顿；和/或，所述凝胶过滤层析柱的筛选分子量范围为100道尔顿-1500道尔顿。10.如权利要求1所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物，其特征在于，所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物包括分子量在25千道尔顿-37千道尔顿之间的和小于10千道尔顿的蛋白质；和/或，所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物抑制革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌；和/或，所述抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物的抑菌活性不受温度的影响；和/或，不受pH值的影响；和/或，受胃蛋白酶或蛋白酶K影响，不受脂肪酶或胰蛋白酶影响。2CN106701833A说明书1/8页一种抑菌的类芽孢杆菌发酵液提取物技术领域[0001]本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种抑菌的类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)发酵液提取物。背景技术[0002]食品在加工、保藏、运输等过程中极易受到外界微生物的污染而发生变质腐败，传统保藏食物的方法通常是腌制、烟熏、地窖存放、酒渍等。随着科学技术的不断发展，化学合成防腐剂成为食品工业中最重要的添加剂之一。然而研究发现这些化学合成防腐剂不仅影响食品原有的风味而且还存在着对人体潜在的诱癌性、致畸性或者造成食物中毒等安全隐患，因此，寻找和开发可有效抑制或杀死食品中病原菌的天然、安全的抗菌剂无疑可促进食品和医药行业的进步。[0003]类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)广泛存在于土壤、植