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动物细胞工程思考与回忆: 1、动物细胞全能性特点? 随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制,分化潜能变窄。细胞核仍具有全能性。 2、能否用植物组织培养的方法使动物细胞发育成动物个体? 不能。动物细胞和组织在体外培养的过程中,伴随一定的组织分化,不管采用什么手段和培养条件,由于细胞的运动、变化,细胞发生结构功能变异,结果长时间的培养只能使单一类型的细胞保存下来,最终成了简单的细胞培养。 3、动物的细胞培养的理论依据(原理)? 细胞增殖 动物细胞培养一、动物细胞培养的应用和概念:定义:人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。强调一:细胞贴壁过程■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。当继续传代培养时,少部分细胞会克服细胞寿命的极限,获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正在朝着同等于癌细胞的方向发展。动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。用胰蛋白酶分散细胞。动物细胞培养适宜的pH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。定义: 当原代培养的细胞处于接触抑制后,用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.(分瓶培养的过程)有关概念比较有关概念比较3、总结:动物细胞培养过程4.动物细胞培养的条件:问题3:为什么用胰蛋白酶处理?问题6、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?5.动物细胞培养技术的应用:植物组织培养和动物细胞培养的比较:见导学教程P31表2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是() A.获得不死性的细胞B.10代以内细胞 C.原代细胞D.传代细胞3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是:() A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡过程中 D、培养至50代后传代细胞遗传物质没有发生改变4、一般说来,动物细胞体外培养需要满足以下条件()5、动物细胞培养的特点() ①细胞贴壁②有丝分裂③细胞分化④接触抑制⑤减数分裂⑥原代培养一般传1-10代 A、①②④⑥B、②③④⑤ C、①③④⑥D、③④⑤⑥6、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答: (1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自______________________。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是,然后用酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的目的是。 (3)培养首先在B瓶中进行,瓶中的培养基成分有________________等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第代,到这时的培养称为__。 (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用 处理,然后配置成,再分装。 `二、动物体细胞核移植技术和克隆动物4、体细胞核移植过程---示动物克隆---无性繁殖多利的一生我国首只克隆牛“康康”在山东出生核移植流程:1、核在进行体细胞核移植之前,为何要去掉受体卵母细胞的核?2、细胞核移植生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程,找出操作过程的不同点?卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高,用它作受体更容易成功。4.体细胞核移植技术的应用前景4.体细胞核移植技术的应用前景5.体细胞核移植技术存在的问题⑴写出a、b所指的细胞工程各称:ab。 ⑵实施细胞工程a时,所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是 :。 ⑶多莉面部的毛色是,判断依据是:。 ⑷继植物组织培养之后,克隆绵羊培育成功,证明动物细胞也具有。 ⑸请举例说明克隆绵羊培育成功的实际意义:。动物细胞融合与 单克隆抗体1970年,有两位科学家 做了一个著名的实验: 人—鼠细胞融合的实验, 以证明细胞膜上的蛋白 质分子是运动的。1、定义:指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。 动物细胞融合2、诱导融合的因素 生物法:灭活的病毒诱导融合.(利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。) 化学法:聚乙二醇PEG诱导融合. 物理法:电激融合3、动物细胞融合技术的应用项目人们获得抗体的传统方法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 效率低,产量有限,纯度低,动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。 运用已学知识,设想怎样获得单一类型的抗体? 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产