论大鼠非酒精性脂肪肝实验模型的建立.pdf

摘要：目的建立一个非酒精性脂肪肝动物模型。方法40只大鼠随机分为
对照组和模型组。模型组给予高脂饮食（15％猪油，8％蛋黄粉，2％胆固醇），
在造模第4周、8周、18周分别取模型组动物各2只，观察其病理模型形成情况。
对照组给予正常饮食。结果造模过程中，模型组动物造模后体重增长较正常对
照组迅速，至8周时，体重较正常组平均重21％，18周时模型动物体重及肝指
数均较正常组显著增加（P关键词：非酒精性脂肪性肝炎；动物模型；动物
实验
目前，非酒精性脂肪性肝炎的发病率为％～％［1］，随着人民物质生活
的改善，非酒精性脂肪性肝病的发病率将逐年上升。在某些地区脂肪肝已超过病
毒性肝炎而成为第一大肝病。非酒精性脂肪性肝炎已成为隐源性肝酶升高的最常
见原因，也几乎是至少60％的病因迄今不明的肝硬化病例的基础病因［2］。本
课题采用了高脂饮食复制非酒精性脂肪性肝炎的动物模型，观察非酒精性脂肪性
肝炎的动物模型的病理变化特点。
1材料与方法
材料雄性SD大鼠40只，体重200～220g，清洁级，华中科技
大学同济医学院实验动物中心提供，动物合格证号为SCXK（鄂）20XX-0007，胆
固醇购于上海康成生物试剂有限公司，批号20XX103，猪油、鸡蛋黄自备。
动物分组及处理SD大鼠40只，随机分为两组各20只。除正常
对照组外，全部给予高脂饮食复制非酒精性脂肪性肝炎模型。高脂饮食由普通饲
料加15％猪油，8％蛋黄粉，2％胆固醇组成。在造模第4周、8周、18周分别
处死模型组动物各2只，观察其病理模型形成情况。第18周末将大鼠用2％戊
巴比妥钠（45mg/kg）腹腔注射，麻醉后下腔静脉取血，将血标本离心后用于血
脂检测；取肝左叶，用10％中性福尔马林溶液固定，石蜡包埋切片，作肝组织
病理学观察。
观察指标及检测
一般项目观察动物的体重、饮食、毛发、活动情况、肝/体重比
等。
血脂检测于动物处死前，采取各组动物血液分离血清，采用
OLYMPUSAU2700全自动生化分析仪检测，采用贝克曼生化试剂盒。
病理学观察取新鲜肝组织左叶，用10％中性福尔马林固定，石
蜡包埋5m切片，HE染色作肝组织病理学观察，了解肝组织脂肪变性、炎症活
统计学方法计量资料用SPSS统计软件进行统计分析。等级资料
用秩和检验。计数资料用2检验。
2结果
动物的一般情况实验期间正常组动物精力充沛，灵活好动，饮食
正常，皮毛整洁，体重缓慢增加；模型组饮食量大，嗜睡，毛色偏黄，个体较大，
体重增长较正常组较快，至8周时，模型组各动物体重较正常组平均重21％，
有不同程度的精神萎靡，活动减少，皮毛凌乱。
体重和肝指数两组大鼠体重和肝指数情况见表1。表1各组动
物体重、肝指数变化情况注：模型组较正常组体重及肝指数均显著增加（P<）
血脂两组大鼠TG、TC、、C的影响，见表2。表2实
验结束时各组动物血脂情况注：模型组与正常组相比，TG、TC、、
差异有显著性（P<）
肝脏病理学变化
肉眼观察正常组大鼠肝脏形态正常，18周时无一例出现异常。
模型组大鼠造模4周起肝脏外形稍饱满圆钝，质地较脆，色红；8～12周肝脏体
积增大，包膜紧张，色泽灰黄，切面油腻；18周时，模型组动物肝脏明显增大，
包膜紧张，边缘较钝，质地略软，色变黄，表面呈花斑状，触之似泥块并有油腻
感，部分大鼠肝脏有黄白色的局灶性脂肪沉积。
光镜观察正常组肝小叶结构正常，肝细胞以中央静脉为中心呈放
射状排列。无肝细胞肿胀及脂肪变。模型组肝组织HE染色显示：造模4周后大
鼠肝脏即有轻微的肝细胞脂肪变性，标本还出现汇管区及小叶内炎症细胞浸润和
散在的点状坏死（图1）。造模8周大鼠多呈中度脂肪变，且炎症活动积分明显
高于造模4～8周大鼠，可见到小叶内炎症，炎症细胞主要以单核细胞为主，炎
症程度明显加重（图2）。造模18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪变，脂滴分布密
度增大，可见大部分肝细胞浆含大脂滴，部分脂滴形成大空泡，将细胞核挤压至
一边，且以中央静脉周围为甚；肝小叶结构破坏，肝细胞排列不规整，并伴大量
肝细胞肿胀，部分呈气球样变，汇管区炎症尚轻微（图3）。
3讨论
国内外学者们根据脂肪肝的病因，设计出多种造模方式，如高脂饲料喂养，
酒精损害，毒物损伤（CCl4、乙硫氨酸），复合因素（乙醇-高脂饮食-CCl4）等
［3］。各种动物模型的形成机制及病理改变各异，实验者可根据研究目的选择合
适的动物模型，理想的动物模型应与人类疾病特征相似，病变有一定发展过程，
同时形成率高，死亡率低，重复性好，造模方法简便易行［4］。本研究根据
针对国内外已有能诱发脂肪肝模型的高脂饲料配方进行了改良［～9］，
加大其中胆固醇及猪油所占比例，延长其造模时间为18周。该实验研究表明，
本模型具有以下特点：体重明显增加，至8周时，体重较正常组平均重21％