正交试验优选荔枝草中总黄酮的提取工艺(标红).docx

正交试验优选荔枝草中总黄酮的提取工艺摘要目的：优化荔枝中总黄酮的提取工艺。方法：采用芦丁为对照品利用紫外分光光度法检测荔枝草中总黄酮的含量。在单因素试验考察溶剂的基础上采用L9（34）正交试验法选择荔枝草中总黄酮的提取工艺并以溶剂浓度、提取温度、溶剂用量和提取时间为考察因素。结果：最佳提取工艺为：添加20倍量的70%C2H5OH80℃提取120分钟总黄酮提取率为6.86%。结论：优化的提取工艺简便、准确、重现性好可用于工业生产荔枝草总黄酮提取。关键词荔枝草；正交试验；总黄酮；提取工艺荔枝草是唇形科鼠尾草属植物荔枝草SalviaplebeiaR.Br.的全草其主要成分有黄酮、酚类、木质素、甾醇和挥发油等成分[1]。荔枝草性凉具有清热解毒凉血利尿消除水肿的作用。可以治疗乳腺炎、痔疮肿痛、出血、跌打损伤痈疮湿疹[2]；临床用于治疗急性扁桃体炎、阴道炎、宫颈糜烂等[3]。本文主要通过单因素试验和正交试验对荔枝草叶总黄酮的提取工艺进行了优化。1材料仪器试药荔枝草药品来自广西大明山芦丁（中国食品药品检定研究院）试剂均为分析纯。2方法和结果总黄酮含量测定[5]对照品芦丁溶液的制备精密称取芦丁的标准品10.9mg将标准品放入50mL容量瓶中再在容量瓶中滴加70%C2H5OH超声将标准品溶解再用C2H5OH定容至刻度线即得0.218mg/mL的芦丁标准品溶液。供试品溶液的制备称取荔枝草全草2g将荔枝草全草撕碎放入500mL圆底烧瓶中再在容量瓶中加入70%C2H5OH20mL将容量瓶置于水浴锅上连续回流提取2次每次1.5h趁热滤过合并滤液稀释后倒入100mL容量瓶中用C2H5OH定容至刻度线即得样品待测液。最大吸收波长的选择将荔枝草提取液、对照品溶液和70%C2H5OH溶液分别精密吸取一定量并分别放置于三个25mLmL的5％NaNO2上下颠倒几次摇晃均匀后静置6minmL10％的Al(NO3)3mL4%的NaOH再用70%C2H5OH溶液至容量瓶刻度线摇匀后放置15min。最后按照紫外可分光光度法对波长进行试验在400～700nm处波长范围内扫描。结果荔枝草提取液在500nm波长处存在最大吸收芦丁溶液502nm处存在最大吸收峰空白对照品在此处不存在吸收峰所以确定最大吸收波长是500nm（图A、B、C）。2.1.4标准曲线的制作分别精密吸取1、2、4、6、8mL的芦丁对照品溶液将其滴加入三个25mLmL5％的NaNO2mL10％的Al(NO3)3mL4%的NaOH再用70%C2H5OH溶液至容量瓶刻度线摇匀后放置15min。并采用相应的试剂为空白可以在500nm波长处检测吸光度（A）。以吸光度（A）为纵坐标用质量浓度（c）为横坐标绘制标准曲线就可以得到回归方程为A=0.0111c+0.0085(R=0.9991n=5）。结果表明芦丁质量浓度在8.72~69.76μg·mL-1范围内与吸光度呈良好线性关系。见表1-1图1-1。2.1.5精密度试验精密吸取芦丁对照品溶液5份按2.1.3项显色连续测定5次其吸光度并记录RSD=0.4％（<2%）结果见表1-2。2.1.6稳定性试验精密吸取荔枝草溶液1mL并将其滴加于25mL容量瓶中按2.1.3项显色后存放在室温下在0102030405060min后测定荔枝草溶液吸光度RSD＝0.62%（<2%）。结果表明荔枝草溶液中总黄酮含量在60min内显色稳定结果见表1-3。2.1.7重复性试验精密称定荔枝草药材样品6份每份1g按2.1.2项下方法制备6份并按2.1.3项显色测定吸光度6次RSD=