基因功能分析的基本策略课件.pptx

第十二章转基因模型是研究基因功能的主要手段第一节转基因技术一.转基因生物的意义二、基本原理基本原理基本原理基本原理基本过程1.上游—基因改造和载体构建动物转基因常用的载体2.中游—基因转移、胚胎移植与建系1)DNA显微注射法DNA显微注射DNA显微注射DNA显微注射法的特点提高显微注射DNA表达的成功率2)胚胎干细胞法胚胎干细胞法胚胎干细胞的分离和培养胚胎干细胞的分离和培养胚胎干细胞外源DNA的导入外源DNA的整合胚胎干细胞法的特点3）逆转录病毒感染法逆转录病毒感染法逆转录病毒感染法的特点4）精子载体法DNA3.下游—基因整合与表达检测及筛选鉴定方法基因转移鼠纯合鼠系的建立三、转基因动物的应用人类疾病的转基因动物模型人类疾病的转基因动物模型利用转基因动物反应器生产药用蛋白转基因改良移植器官动物的克隆核移植技术（NuclearTransfer)第二节基因打靶一、基因打靶的基本程序1.打靶载体的构建2.打靶载体导入ES细胞打靶载体的正-负选择打靶载体的正筛选打靶载体的负筛选PCR鉴定PCR鉴定：特异整合基因敲除小鼠的获得基因敲除和RNA干扰第三节RNA干扰RNA干扰是dsRNA导致的基因沉默RNAi是真核生物中广泛存在的现象RNA干扰siRNA的产生siRNA诱导同源序列的降解基因沉默的机制是多方面的RNAi和基因敲除dsRNA能够诱发细胞的抗病毒反应siRNA与shRNAshRNA表达载体系统miRNA表达载体系统siRNA设计原则shRNA与siRNA应用的局限shRNA与siRNA的比较9、静夜四无邻，荒居旧业贫。。8月-248月-24Monday,August5,202410、雨中黄叶树，灯下白头人。。08:59:2208:59:2208:598/5/20248:59:22AM11、以我独沈久，愧君相见频。。8月-2408:59:2208:59Aug-2405-Aug-2412、故人江海别，几度隔山川。。08:59:2208:59:2208:59Monday,August5,202413、乍见翻疑梦，相悲各问年。。8月-248月-2408:59:2208:59:22August5,202414、他乡生白发，旧国见青山。。05八月2024上午8时59分22秒08:59:228月-2415、比不了得就不比，得不到的就不要。。。八月24上午8时59分8月-2408:59August5,202416、行动出成果，工作出财富。。2024年8月5日星期一8时59分22秒08:59:2205August202417、做前，能够环视四周；做时，你只能或者最好沿着以脚为起点的射线向前。。上午8时59分22秒上午8时59分08:59:228月-249、没有失败，只有暂时停止成功！。8月-248月-24Monday,August5,202410、很多事情努力了未必有结果，但是不努力却什么改变也没有。。08:59:2208:59:2208:598/5/20248:59:22AM11、成功就是日复一日那一点点小小努力的积累。。8月-2408:59:2208:59Aug-2405-Aug-2412、世间成事，不求其绝对圆满，留一份不足，可得无限完美。。08:59:2208:59:2208:59Monday,August5,202413、不知香积寺，数里入云峰。。8月-248月-2408:59:2208:59:22August5,202414、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。05八月2024上午8时59分22秒08:59:228月-2415、楚塞三湘接，荆门九派通。。。八月24上午8时59分8月-2408:59August5,202416、少年十五二十时，步行夺得胡马骑。。2024年8月5日星期一8时59分22秒08:59:2205August202417、空山新雨后，天气晚来秋。。上午8时59分22秒上午8时59分08:59:228月-249、杨柳散和风，青山澹吾虑。。8月-248月-24Monday,August5,202410、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。08:59:2208:59:2208:598/5/20248:59:22AM11、越是没有本领的就越加自命不凡。8月-2408:59:2208:59Aug-2405-Aug-2412、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。08:59:2208:59:2208:59Monday,August5,202413、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。8月-248月-2408:59:2208:59:22August5,202414、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。05八月2024上午8时59分22秒08:59:228月-2415、最具挑战性的挑战莫过于提升自我