11DNA重组技术的基本工具.doc

专题1基因工程
1.1DNA重组技术的基本工具
执教：顾晓芹年级：高二地点：
【学习目标】
说出限制性核酸内切酶的作用
说出DNA连接酶的作用
理解基因载体的特点
【活动方案】
活动一：说出“分子手术刀”——限制性核酸内切酶的作用
DNA重组技术中需要将不同的DNA分子拼接在一起，在拼接之前需要将DNA分子进行切割，此时就需要用到“分子手术刀”——限制性核酸内切酶。结合课件、教材，思考回答下列问题：
限制性核酸内切酶是从哪里分离出来的？

限制性内切酶的专一性体现在哪些方面？

3．结合右图回顾DNA分子结构的相关知识
（1）DNA的基本单位是___________。
（2）DNA分子中的____________和__________交替排列在外侧构成基本骨架，内侧是__________。
两条链上的碱基通过________连接成碱基对，相邻两个脱氧核苷酸之间通过______________相连。
请在右图用箭头标注EcoRI切割位点

下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，SmaI以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，利用所给材料，模拟进行DNA“切割”。

活动二：说出“分子缝合针”——DNA连接酶的作用
将限制性核酸内切酶切割后的DNA拼接在一起，需要使用“分子缝合针”——DNA连接酶。
1.阅读教材相关内容，完善下列比较：
分类E．coliDNA连接酶T4DNA连接酶
“缝合”末端

2.活动一模拟进行DNA切割后产生了不同的末端，你能找到可以与之相连的末端吗？尝试用胶带（代表DNA连接酶）将末端黏合起来。说说需要加入什么样的DNA连接酶？

活动三：概述“分子运输车”——基因载体的特点
将外源DNA送入细胞需要利用“分子运输车”——基因载体。
阅读教材相关内容，结合图1-5，分析下列问题：
（1）请归纳出质粒作为常用基因载体的三个优势条件？
①_________________________
②_________________________
③_________________________
（2）常用基因载体有哪些？

（3）作为基因载体必须具备哪些条件？

【检测反馈】
1．限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何

A．BamHI和EcoRI；末端互补序列-AATT-B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列-GATC-C．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列-AATT-D．BamHI和BglII；末端互补序列-GATC-
2.下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是
A.DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键
B.DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖
C..DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖
D.同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端
3.不属于质粒被选为基因载体的理由是
A.能复制B.有多个限制酶切点C.具有标记基因D.它是环状DNA
4.科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是
A.提高受体细胞在自然环境中的耐热性
B.有利于检测目的基因是否导入受体细胞
C.增加质粒分子的相对分子质量
D.便于与外源基因连接