张弓老酒大曲中高产纤维素酶菌株的分离鉴定.pdf

基因组学与应用生物学，2020年，第39卷，第9期，第4031-4040页

研究报告
ResearchReport
张弓老酒大曲中高产纤维素酶菌株的分离鉴定

刘延波1,2刘莹莹1,2赵志军1,2刘润雨1,2潘春梅1,2孙西玉1,2,3*
1河南牧业经济学院食品与生物工程学院(酒业学院),郑州,450046;2河南牧业经济学院,河南省白酒风格工程技术研究中心,郑州,450046;3张
弓老酒酒业有限公司,宁陵,476733
*通信作者,******************

摘要本研究以羧甲基纤维素钠为唯一碳源作初筛培养基，利用刚果红变色圈法从张弓老酒酒业有限公司
大曲中分离得到一株高产的纤维素酶细菌D39。经细菌形态学观察，生理生化实验，并结合16SrDNA序列分
析，初步鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。并通过单因素试验和响应面试验优化确定最佳产酶条件为：
接种量4%，培养时间3d，pH值4。优化后其酶活为1014U/mL，与优化前相比产酶能力提高1.3倍。本研究结
果可为后续提高酿酒原料利用率，缩短发酵时间，以及控制大曲发酵培养工艺提供参考依据。
关键词大曲,纤维素酶,芽孢杆菌,分离鉴定,响应面优化
IsolationandIdentificationofHigh-yieldCellulaseStrainsfromZhangGong-
LaoJiuDaqu

LiuYanbo1,2LiuYingying1,2ZhaoZhijun1,2LiuRunyu1,2PanChunmei1,2SunXiyu1,2,3*
1CollegeofFoodandBioengineering(LiquorCollege),HenanUniversityofAnimalHusbandryandEconomy,Zhengzhou,450046;2HenanLiquor
StyleEngineeringTechnologyResearchCenter,HenanUniversityofAnimalHusbandryandEconomy,Zhengzhou,450046;3ZhangGongLaoJiuWine
Co.Ltd.,Ningling,476733
*Correspondingauthor,******************
DOI:10.13417/j.gab.039.004031

AbstractInthisexperiment,sodiumcarboxymethylcellulosewasusedasthesolecarbonsourceastheprimary
screeningmedium.Ahigh-yieldcellulasebacteriumD39wasisolatedfromtheZhangGongLaoJiuDaqubyCongo
redcolorcirclemethod.Throughbacterialmorphology,physiologicalandbiochemicalexperiments,combined
with16SrDNAsequenceanalysis,D39wasinitiallyidentifiedasBacillussubtilis.Theoptimalfermentation
conditionsweredeterminedbysinglefactorandresponsesurfacetestoptimization:inoculationamount4%,
culturetime3d,pH=4.Afteroptimization,theenzymeactivitywas1014U/mL,whichwas1.3timeshigher
thanthatbeforeoptimization.Theresultsofthisstudycouldprovidereferencesforfurtherimprovingtheutiliza-
tionrateofbrewingmaterials,shorteningthefermentationtime,andcontrollingthefermentationculturetechnol-
ogyofDaqu.
KeywordsDaqu,Cellulase,Bacillus,Isolationandidentification,Responsesurfaceoptimization

中国白酒在世界上独树一帜，其中浓香型白酒口感和质量，由此可见曲在酿酒过程中的重要性(赵
占有举足轻重的地位(王明跃和张文学,2014;于学建金松等,2019)。白酒大曲作为酿酒微生物和酶的载
等,2019)。“曲为酒之骨”，酒曲的好坏