幼苗及种子特异表达型大豆GmPLPA基因启动子及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN101914534A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN101914534A(43)申请公布日2010.12.15(21)申请号201010168982.7C12N15/11(2006.01)(22)申请日2010.05.05A01H5/00(2006.01)(71)申请人东北农业大学地址150030黑龙江省哈尔滨市香坊区木材街59号(72)发明人李文滨罗秋兰赵琳韩英鹏(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司11245代理人关畅任凤华(51)Int.Cl.C12N15/113(2010.01)C12N15/63(2006.01)C12N5/10(2006.01)C12N1/15(2006.01)C12N1/19(2006.01)权利要求书1页说明书11页序列表2页C12N1/21(2006.01)附图7页(54)发明名称幼苗及种子特异表达型大豆GmPLPA基因启动子及其应用(57)摘要本发明公开了一种幼苗及种子特异表达型大豆GmPLPA基因启动子及其应用。本发明提供的启动子为序列1所示的DNA分子或其部分片段。GmPLPA基因启动子在大豆中是首次被克隆。本发明的启动子可应用于在植物发育的特定时期(如幼苗期)或植物的特定组织(如种子)表达靶基因，避免组成型启动子启动靶基因造成的资源浪费，具有特异性强效率高的优点。本发明提供的启动子可应用于定向培育安全性高的转基因植物新品种，对于植物育种和靶基因功能及作用机理的研究，具有很大价值。CN109453ACN101914534A权利要求书1/1页1.DNA片段，为如下1)至9)中任一所述的DNA分子：1)序列表的序列1自5’端第943至1497位核苷酸所示的DNA分子；2)序列表的序列1自5’端第831至1497位核苷酸所示的DNA分子；3)序列表的序列1自5’端第633至1497位核苷酸所示的DNA分子；4)序列表的序列1自5’端第359至1497位核苷酸所示的DNA分子；5)序列表的序列1自5’端第284至1497位核苷酸所示的DNA分子；6)序列表的序列1自5’端第14至1497位核苷酸所示的DNA分子；7)序列表中序列1所示的DNA分子；8)在严格条件下与1)至7)中任一所述DNA序列杂交且具有启动子功能的DNA分子；9)与1)至7)中任一所述DNA序列具有90％以上同源性，且具有启动子功能的DNA分子。2.含有权利要求1中任一所述DNA片段的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。3.如权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为在pBI121的多克隆位点插入权利要求1中任一所述DNA片段得到重组质粒。4.扩增权利要求1中任一所述DNA片段的引物对。5.权利要求1中任一所述DNA片段在启动目的基因表达中的应用。6.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述目的基因表达为时间特异性表达和/或组织特异性表达；所述时间特异性表达为苗期表达或种子形成期表达；所述组织特异性表达为拟南芥根特异性表达、烟草叶片特异性表达或大豆种子特异性表达。7.一种培育转基因植物的方法，是将权利要求1中任一所述DNA片段导入目的植物，得到转基因植物。8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：是将权利要求1中任一所述DNA片段和目的基因导入所述目的植物，在所述目的植物中用所述DNA片段启动所述目的基因的表达，得到时间特异性表达所述目的基因和/或组织特异性表达所述目的基因的转基因植物；所述时间特异性表达为苗期或种子形成期表达；所述组织特异性表达为拟南芥根特异性表达、烟草叶片特异性表达或大豆种子特异强表达；所述拟南芥优选为拟南芥品种哥伦比亚生态型拟南芥；所述烟草优选为烟草品种PetiteHavanaSR1；所述大豆优选为大豆品种黑农44；所述目的基因优选为GUS基因；所述方法优选为将权利要求3所述重组载体导入所述目的植物。9.权利要求1所述DNA片段在培育转基因植物中的应用。10.如权利要求9所述的应用，其特征在于：所述转基因植物为抗病性和/或产量和/或耐逆性高于出发植物的转基因植物。2CN101914534A说明书1/11页幼苗及种子特异表达型大豆GmPLPA基因启动子及其应用技术领域[0001]本发明涉及一种幼苗及种子特异表达型大豆GmPLPA基因启动子(pGmPLPA)及其应用。背景技术[0002]真核生物基因表达的调节，一方面受控于基因调控的顺式作用元件，另一方面同时受到一系列反式作用因子的调控，即具调控作用的蛋白质因子。作用于真核细胞基因表达的顺式作用元件由启动子和调节序列组成。启动子(promoter)是一段能够被RNA聚合酶识别和结合的DNA序列，能活化RNA聚合酶，指导全酶与模板的结合，决定转录起始的特异形式及频率。多数启动子位于基因的