茯苓多糖提取分离的方法.ppt

茯苓多糖的分离纯化1概述2茯苓多糖结构及理化性质3茯苓多糖的提取4茯苓多糖纯化方法1概述现代研究认为茯苓的主要成分为茯苓聚糖、茯苓酸、蛋白质、卵磷脂、脂肪、胆碱等。有效成分主要是茯苓多糖。它能增强小鼠的淋巴细胞功能；促进体液免疫；可使胸腺淋巴结增大；末梢血中的细胞数量增多。茯苓多糖还有很强的抗肿瘤作用，可延长患癌症动物生存期。2茯苓多糖结构及理化性质硫酸酯化茯苓多糖结构3茯苓多糖的提取3.1水提醇沉法3.2稀碱浸提法3.3酶+热水浸提法3.4微波、超声波辅助提取法3.5发酵醇沉法4茯苓多糖纯化方法（1）脂类物质的去除氯仿—甲醇是另一种有效的溶剂，它对于脂蛋白，磷脂的提取效率较高，特别适用于水产品、家禽、蛋制品等食品脂肪的提取。索氏提取法适用范围与特点此法适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结块的样品的测定。索氏提取法测得的只是游离态脂肪，而结合态脂肪测不出来。仪器滤纸筒的制备→样品制备→索氏提取器的准备→抽提→回收溶剂将滤纸裁成8cm×15cm大小，以直径为2.0cm的大试管为模型，将滤纸紧靠试管壁卷成圆筒型，把底端封口，内放一小片脱脂棉，用白细线扎好定型，在100~1050C烘箱中烘至恒量（准确至0.0002g）。②样品制备样品于100~1050C烘箱中烘干并磨碎，或用测定水分后的试样。准确称取2~5g试样于滤纸筒内，封好上口。将装有试样的滤纸筒放入带有虹吸管的提脂管中，倒入乙醚，满至使虹吸管发生虹吸作用，乙醚全部流入提脂烧瓶，再倒入乙醚，同样再虹吸一次。此时，提脂烧瓶中乙醚量约为烧瓶体积2/3。接上回流冷凝器，在恒温水浴中抽提，控制每分钟滴下乙醚80滴左右（夏天约控制650C，冬天约控制800C），抽提3~4h至抽提完全（视含油量高低，或8~12h，甚至24h）。可用滤纸或毛玻璃检查，由提脂管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留下痕迹。⑤回收溶剂结果计算①此法原则上应用于风干或经干燥处理的试样，但某些湿润、粘稠状态的食品，添加无水硫酸钠混合分散后也可设法使用索氏提取法。②乙醚回收后，烧瓶中稍残留乙醚，放入烘箱中有发生爆炸的危险，故需在水浴上彻底挥净，另外，使用乙醚时应注意室内通风换气。仪器周围不要有明火，以防空气中有机溶剂蒸气着火或爆炸。③提取过程中若有溶剂蒸发损耗太多，可适当从冷凝器上口小心加入（用漏斗）适量新溶剂补充。④提取后烧瓶烘干称量过程中，反复加热会因脂类氧化而增量，故在恒量中若质量增加时，应以增量前的质量做为恒量。为避免脂肪氧化找成的误差，对富含脂肪的食品，应在真空干燥箱中干燥。（2）去蛋白茯苓多糖鉴定及含量测定****茯苓多糖硫酸酯(PS)A值分光光度计吸收值****加刺激原LPS后,B淋巴细胞增殖显著增加****免疫抑制剂5-Fu则显著抑制脾脏和胸腺的生长本实验结果表明PS显著促进荷瘤小鼠脾脏和胸腺淋巴器官的发育生长,体外对小鼠淋巴细胞尤其是B淋巴细胞的增殖有显著促进作用,且可显著提高正常小鼠NK细胞杀伤活性,可以通过促进淋巴细胞增殖,增强机体特异免疫功能而发挥抗肿瘤作用。而且PS可以拮抗免疫抑制药52Fu所致的免疫抑制。