散射比浊_透射和散射比浊法测定血清免疫球蛋白的评价.docx

散射比浊_透射和散射比浊法测定血清免疫球蛋白的评价临床检验杂志2005年第23卷第3期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2005,Vol123,No13文章编号:1001-764X(2005)03-0189-03中图分类号:R44616文献标识码:A189#论著#*透射和散射比浊法测定血清免疫球蛋白的评价孙虹,王凡,孙鷖,赵崇吉,张昱,牛华(云南省临床检验中心,昆明650032)摘要:目的对同一临床实验室采用透射比浊和散射比浊法测定血清免疫球蛋白IgA、IgG和IgM结果偏差进行评估。方法按照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件,以散射比浊为比较方法,透射比浊为实验方法进行对比及偏差评估,将测定数据进行相关分析,并对两分析系统之间的预期偏差进行评估。结果IgA、IgG两法各浓度值测定结果的预期偏差均可以接受;IgM浓度为1.0g/L时,两法测定结果的预期偏差不能接受,其余浓度值测定结果的预期偏差可以接受。结论在使用性能较好的全自动生化分析仪及配套试剂的前提下,透射比浊法测定血清IgA、IgG和IgM的结果与散射比浊法的测定结果基本一致。关键词:免疫球蛋白;透射比浊法;散射比浊法;偏差目前,我国临床实验室测定血清IgA、IgG和IgM的方法主要有两类,一类是在特种蛋白分析仪上用散射比浊法测定,另一类是在全自动生化分析仪上用透射比浊法测定。由于两法的测定原理和仪器不同,其结果可能有所差异。为了解两法测定结果偏差的大小,我们根据美国国家实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件[1]和IgM的双份平行测定,每个项目分5个工作日完成40份样本的测定。1.6统计分析以透射比浊为实验方法(Y),散射比浊为比较方法(X),按照EP9-A文件对两种方法的测定结果进行方法对比和偏倚评估,EP9-A统计软件由云南省临床检验中心开发。1.6.1计算IgA、IgG和IgM每个样本测定结果的均值(Xi和Yi)、样本重复测定值间差值的绝对值(Dxi和Dyi)及两种方法测定结果均值间的差值(Yi-Xi)。1.6.2按EP9-A文件进行方法内及方法间离群值检查。计算样本重复测定值间差值(Dxi和Dyi)的平均数和两种方法测定结果均值间差值(Yi-Xi)的平均数,超出上述平均数4倍时,为离群值应予删除,从数据组中删除的数据不能超过2.5%。1.6.3以Y对iXi作散点图,以(Yi-Xi)对Xi作偏差图,得到每个结果的散点图和偏差图。1.6.4计算两种方法的线性回归方程。1.6.5估算IgA、IgG和IgM在3个不同医学决定水平的预期偏差、相对偏差和预期偏差95%的可信区间。以美国临床病理家学会(CAP)要求的质量目标及人群正常生理变异情况提出的允许分析误差的限度,计算出各项目给定医学决定水平(XC)的允许误差(EA),将预期偏差的可信区间与给定医学决定水平的EA相比较:当EA>预期偏差可信区间的上限时,实验方法与对比方法相当,偏差可以接受;当预期偏差可信区间的上限>EA>预期偏差可信区间的下限时,实验方法与对比方法相当;当EA[2],对贝克曼-库尔特Array360特种蛋白分析仪的散射比浊法和日立-罗氏系统的透射比浊法测定血清IgA、IgG和IgM的结果进行了方法对比和偏差评价,结果报告如下。1材料和方法1.1仪器日立7600全自动生化分析仪和贝克曼-库尔特Array360特定蛋白分析仪。1.2试剂及校准品罗氏IgA、IgG和IgM试剂(批号:655654、655652、655653)和特殊蛋白校准品(批号:165354);贝克曼-库尔特IgA、IgG和IgM试剂(批号:T304244、T307011、T211043)及校准品(批号:M302135)。1.3样本收集采集云南省第一人民医院检验科门诊及住院病人当日血清,其浓度选择符合EP9-A文件数据分布建议表的要求。1.4质控品在测定中使用贝克曼-库尔特和罗氏质控品进行室内质控,所有测定结果均在良好的室内质控状态下获得。1.5测定方法(1)IgA、IgG和IgM的透射比浊法采用罗氏试剂在日立7600分析仪上测定;散射比浊法采用贝克曼-库尔特试剂在Array360特种蛋白分析仪上测定。(2)每天选取8份临床病人新鲜样本,分别用两法按1y8再8y1的顺序进行IgA、IgG:,,190临床检验杂志2005年第23卷第3期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2005,Vol123,No13法不相当,偏差不能被接受。2结果2.1平行测定结果表1显示了IgA、IgG和IgM各40份样本透射比浊法双份平行测定结果(Y1、Y2)及散射比浊法双份平行测定结果(X1、X2)。表1样本号123s3839403.332.