Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106093369A(43)申请公布日2016.11.09(21)申请号201610492939.3(22)申请日2016.06.29(71)申请人福建农林大学地址350002福建省福州市仓山区上下店路15号(72)发明人林胜董亚强尤民生(74)专利代理机构福州元创专利商标代理有限公司35100代理人蔡学俊(51)Int.Cl.G01N33/50(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图7页(54)发明名称Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法(57)摘要本发明涉及一种Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法。该方法通过年龄-龄期两性生命表对褐飞虱的生态适合度进行研究，从而阐明Bt水稻对褐飞虱的生态安全性风险；具体包括五个部分：（1）发育历期和寿命；（2）年龄-龄期存活率；（3）生殖力和种群参数；（4）寿命期望和生殖价值；（5）年龄分布和种群预测；通过五个方面的比较分析综合评价Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的生态风险。本发明在实验室内利用两性种群生命表建立了系统评价Bt水稻非靶标效应的评价方法，对完善Bt水稻对非靶标生物的影响研究以及确定Bt水稻种植的生态安全性具有重要意义。CN106093369ACN106093369A权利要求书1/1页1.一种Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法，其特征在于：包括如下步骤，S1：计算并记录褐飞虱在Bt水稻及其对照非转基因水稻上包括发育历期、寿命以及生殖力的参数；S2：计算褐飞虱在Bt水稻及其对照非转基因水稻上的年龄-龄期存活率；S3：计算褐飞虱在Bt水稻及其对照非转基因水稻上的生殖力和种群动态参数；S4：计算褐飞虱在Bt水稻及其对照非转基因水稻上的寿命期望和生殖价值；S5：分析褐飞虱在Bt水稻及其对照非转基因水稻上的稳定年龄-龄期分布和种群预测。2.根据权利要求1所述的Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法，其特征在于：所述Bt水稻选择转cry1Ab基因抗虫水稻mf-MH3301-1，所述对照非转基因水稻为对照亲本非转基因水稻MH3301。3.根据权利要求1所述的Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法，其特征在于：所述步骤S1中是通过Bootstrap方法来计算褐飞虱在Bt水稻及其对照非转基因水稻上包括发育历期、寿命以及生殖力的参数。4.根据权利要求1所述的Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法，其特征在于：所述S2-S5采用年龄-龄期两性生命表方法，具体即通过年龄-龄期两性生命表计算机程序Twosex-MSChart对步骤S1记录参数进行分析获得年龄-龄期存活率、生殖力、种群动态参数、寿命期望、生殖价值、稳定年龄-龄期分布和种群预测。5.根据权利要求1或4所述的Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法，其特征在于：所述褐飞虱在Bt水稻及其对照非转基因水稻上的种群动态参数计算公式如下：其中，n是褐飞虱全龄期数，x和i为年龄，j为龄期；lx指整个种群存活到年龄x的概率；Sxj指新孵化个体存活到x年龄j龄期的概率；mx指种群在年龄x的平均产卵量；fxj指雌成虫在年龄x的平均产卵量；R0为净增殖率；r为内禀增长率；λ为周限增长率；T为世代平均周期；GRR为总繁殖力GRR；Rx为年龄特征增殖率。6.根据权利要求1所述的Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法，其特征在于：褐飞虱在玻璃试管中单头饲养，该玻璃试管直径3cm高度20cm。2CN106093369A说明书1/7页Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法技术领域[0001]本发明属于转基因作物生态安全风险评价技术领域，尤其是一种Bt水稻对非靶标害虫褐飞虱的安全性评价方法。背景技术[0002]水稻是我国的重要粮食作物，在粮食生产占据着至关重要的战略地位(夏如兵，2009)，同时水稻也是虫害最严重的粮食作物(张文辉和刘光杰，2001)。近年来由于全球气候变暖，二化螟、三化螟、大螟和稻纵卷叶螟等鳞翅目害虫对水稻的为害程度日益严重，给农民带来了严重的经济损失(韩永强等，2008；雷惠质和江建云，1996)。利用基因工程技术培育的转Bt抗虫水稻能够有效地防治鳞翅目害虫，其表达的Bt毒蛋白对靶标害虫有极高的抗性(蔡万伦等，2008；肖汉祥等，2011；徐雪亮等，2013)。然而，靶标害虫生态位的缺失，是否会引起非靶标害虫(叶蝉类，飞虱类等)种群密度的上升，从而由次要害虫转变为主要害虫(Luetal,2010)。截止目前，全球已有20多个国家种植转基因作物(James，2015)。为确保转基因作物的安全使用，针对非靶标生物的生态安全风险评估是必要的(Yuetal,2011)。[0003]褐飞虱[Nilaparvatalugens()]，属半翅目飞虱