一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107090488A(43)申请公布日2017.08.25(21)申请号201710259302.4(22)申请日2017.04.20(71)申请人黑龙江省农业科学院园艺分院地址150069黑龙江省哈尔滨市香坊区哈平路666号(72)发明人赫卫张慧王莹董延龙(74)专利代理机构北京东和长优知识产权代理事务所(普通合伙)11564代理人周捷(51)Int.Cl.C12Q1/18(2006.01)C12Q1/04(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图4页(54)发明名称一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法(57)摘要本发明公开了一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，包括以下步骤：(1)辣椒果准备；(2)菌种的选择；(3)辣椒果接种；(4)病情调查与评价。本发明的辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其优势在于发病时间短、对病菌的需求量小，且解决了大量培养菌的耗时耗力问题；同时可以量化，能有效区分抗感疫病品种；本方法快速简洁，操作简单，可大量筛选品种，有利于抗病品种的筛选；而且，可保存辣椒原有植株，并且对植株的生长无影响；在辣椒青果期都可以进行试验，青果期2个月，试验周期耗时短，试验时间充足。CN107090488ACN107090488A权利要求书1/1页1.一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)辣椒果准备：选取不同类型的辣椒品种进行种植，采收健康完整的辣椒果备用；(2)菌种的选择：将在室内低温保存的辣椒疫霉病菌菌种接种在燕麦固体培养基上进行培养，在25℃-28℃下恒温暗培养3天至白色菌丝充分生长繁殖布满整个培养基表面，继续培养4天，然后在25℃-28℃恒温下光/暗交替培养7天至产生孢子囊，切割菌饼备用；(3)辣椒果接种：将步骤(1)的辣椒果用灭菌水冲洗，再用酒精冲洗灭菌，在铁盘内垫上双层滤纸，将辣椒果放在上面，用灭菌刀片在果上切去直径7mm表皮，将菌饼有菌丝的一面紧贴在伤口上，温度控制在30℃，光照16h后，25℃黑暗培养8h，采用保鲜膜覆盖在铁盘上面保湿，促使病害的发生；(4)病情调查与评价：接种3天后，调查每个接种点发病情况，按分级标准进行病情级数调查，并计算出每个辣椒果的病情指数：辣椒果接种法调查标准分五级：0级—无病；1级—果面上出现水浸状病斑，病斑直径≤2厘米；2级—果面上出现水浸状病斑，病斑直径2-4厘米；3级—果面上的水浸状病斑已严重变软，果表皮与果肉分离，病斑直径≥4厘米；4级—果面上的水浸状病斑已完全或几乎覆盖果表面；病情指数＝∑(各级病果数×相对级值)/(调查总果数×最高级值)×100；抗病性划分标准：抗病(R)病情指数≤15；中抗(MR)15<病情指数≤30；中感(MR)30<病情指数≤50；感病(S)病情指数>50。2.根据权利要求1所述的辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其特征在于，所述步骤(1)的辣椒品种的种植包括：将辣椒苗播种前进行种子消毒处理，用52-55℃的温水浸种30min，1％硫酸铜溶液浸泡5min，然后用清水冲洗干净，再浸种催芽后播种。3.根据权利要求1所述的辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其特征在于，所述步骤(2)的燕麦培养基的制作方法为：将燕麦片20g，水1000ml，煮沸30min，双层纱布过滤去渣，上清液补足水至1000ml，加入琼脂20g，煮沸待琼脂溶化后分装，121℃下高压灭菌20min，无菌条件下分装于无菌培养皿中。4.根据权利要求1所述的辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其特征在于，所述步骤(2)切割菌饼为边长5mm的菌饼。5.根据权利要求1所述的辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其特征在于，所述辣椒果是指青果期的辣椒果实。2CN107090488A说明书1/6页一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法技术领域[0001]本发明涉及植物植物病害侵染技术领域，特别涉及一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法。背景技术[0002]辣椒(CapsicumannuumL.)，原产于中拉丁美洲热带地区的墨西哥。15世纪末，哥伦布发现美洲之后把辣椒带回欧洲，并由此传播到世界其他地方。辣椒于明代传入我国，如今在我国各地普遍栽培，成为一种大众化蔬菜。[0003]辣椒在栽培过程中，病虫害种类繁多，危害严重。其中，辣椒疫病在我国的发生危害日益严重，已成为影响辣椒生产的主要病害之一。该病由辣椒疫霉菌(Phytophthoracapsici)引起，是以孢子囊在土壤、田间病残体上越冬，以孢子囊萌发产生游动孢子侵染根部引起病害。该病害发病周期短，流行速度快，常导致辣椒植株成片死亡，给辣椒产业带来严重的经济损失。一般病株率为20-30％，严重时达80％以上。[0004]目前，抗病品种的选育和推广是控制辣椒疫病的主要手段。而较为常用的辣椒