一种植物生长调节剂的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107873732A(43)申请公布日2018.04.06(21)申请号201711068755.5A01N59/20(2006.01)(22)申请日2017.11.03A01N59/02(2006.01)A01P21/00(2006.01)(71)申请人常州市鑫嘉生物科技有限公司地址213102江苏省常州市钟楼区清潭新村188幢502室(72)发明人刘沁李璐刘心(74)专利代理机构北京风雅颂专利代理有限公司11403代理人马骁(51)Int.Cl.A01N63/00(2006.01)A01N37/12(2006.01)A01N59/06(2006.01)A01N59/00(2006.01)A01N59/16(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种植物生长调节剂的制备方法(57)摘要本发明公开了一种植物生长调节剂的制备方法，属于农药领域。本发明通过制备一种植物生长调节剂，仿造植物激素的化学结构，合成了具有生理活性的物质，制备过程中选用SnCl4作为催化剂，硅胶作为载体，由硅和氧组成的一种多孔结构的物质，且硅胶表面的一层羟基，使其本身就具有弱酸性，合成的植物调节剂提高了其硝酸还原酶和过氧化酶的活性，从而加快其光合速度，促进株碳。氮代谢。荧光素酶中的荧光物质可以随植物的生长被植物所吸收进入植物体内，实时监测生长调节剂是否被植物很好的吸收。本发明解决了目前天然存在的植物激素含量低，普通激素类增产农作物污染大，一般生长调节剂作用于作物时营养物质被吸收不能得到检测的问题。CN107873732ACN107873732A权利要求书1/1页1.一种植物生长调节剂的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：以粗孔硅胶为载体，向粗孔硅胶中加入SiO2，SnCl4·5H2O溶液混合均匀，搅拌并加热回流，冷却，抽滤，取沉淀，将沉淀干燥，冷却，得催化剂；将己酸和N,N-二乙氨基乙醇混合均匀，得混合原料，向混合原料中加入甲苯和催化剂，搅拌反应，得反应物，将反应物油浴加热，搅拌回流，薄膜旋转蒸发，除去溶剂甲苯，得去甲苯混合液，减压蒸馏，收集馏分，得减压蒸馏产品，干燥，得N,N-二乙氨基乙醇己酸酯粉末；明亮发光杆菌的培养：将明亮发光杆菌接种至鸡蛋培养基，培养，得明亮发光杆菌活化菌落，挑取明亮发光杆菌活化菌落划线接种至明亮发光杆菌固体培养基，挑取发光度最强，菌径最大的菌落重复划线接种至明亮发光杆菌固体培养基培养2~3次，得纯化明亮发光杆菌落，挑取明亮发光杆菌落接种至明亮发光杆菌液体培养基增菌培养，得增菌培养液，将增菌培养液离心，经细胞压榨机破菌壁，离心，取上清液，向上清液中加入Na2P2O7透析，得一级透析酶液，向一级透析酶液加入聚乙二醇透析，浓缩，得荧光素酶粗制品，将荧光素酶粗制品层析，得荧光素酶粗制品层析物，向荧光素酶粗制品层析物分别加入二硫糖醇磷酸盐缓冲液、EDTA磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集洗脱液，向洗脱液中加入质量分数为45%的硫酸铵，离心，得酶蛋白，除盐透析，DEAE-SephadexA-50柱层析，收集层析液，干燥得到荧光素酶；按质量份数计，取N,N-二乙氨基乙醇己酸酯粉末20~25份，荧光素酶粉末10~15份，硫酸镁8~10份，硝酸钾5~7份，硫酸锰1~2份，硫酸铜2~3份，硫酸锌1~2份混合均匀，得到植物生长调节剂。2.根据权利要求1所述的植物生长调节剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中硅胶规格为80~120目、孔径8~12nm，粗孔硅胶与SiO2、SnCl4·5H2O的质量比为20：3：10。3.根据权利要求1所述的植物生长调节剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中己酸和N,N-二乙氨基乙醇的质量比为1：2，混合原料中与甲苯和催化剂质量比为5：2：3。4.根据权利要求1所述的植物生长调节剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中鸡蛋培养基配方为：按质量份数计，取新鲜鸡蛋液50~80份，谷氨酸钠13~15份，甘油8~10份，孔雀石绿6~8份，磷酸二氢钾1~2份，硫酸镁0.02~0.05份，柠檬酸镁0.2~0.7份，马铃薯淀粉12~15份，pH7.2±0.2，121℃灭菌20min；明亮发光杆菌固体培养基配方为：按质量份数计，取蛋白胨10~15份，牛肉膏15~18份，氯化钠15~20份，琼脂20~23份，pH7.2±0.2，121℃灭菌20min；明亮发光杆菌液体培养基：除去明亮发光杆菌固体培养基中琼脂，其他组分不变。5.根据权利要求1所述的植物生长调节剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中明亮发光杆菌活化菌落的培养条件为18~20℃培养36~48h；明亮发光杆菌落按质量比1：9接种至明亮发光杆菌液体培养基在20~23℃条件下增