一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109006475A(43)申请公布日2018.12.18(21)申请号201810775038.4(22)申请日2018.07.16(71)申请人四川农业大学地址611130四川省成都市温江区惠民路211号(72)发明人张勇孔令灵汤浩茹陈清罗娅孙勃王小蓉张皓月程丽娟(74)专利代理机构成都正华专利代理事务所(普通合伙)51229代理人李亚男(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01G2/30(2018.01)权利要求书1页说明书9页(54)发明名称一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法(57)摘要本发明公开了一种猕猴桃微嫁接方法以及猕猴桃育苗方法，属于植物嫁接技术领域。本发明以‘红阳’‘、米良1号’猕猴桃两个猕猴桃品种为嫁接对象，建立了两种猕猴桃适合试管内嫁接的快繁体系，通过对用于嫁接的外植体、初代培养基、继代培养基、生根培养基、嫁接方法以及嫁接培养基等方面的系统研究，确定了以‘米良1号’猕猴桃组培苗幼苗作为砧木，以‘红阳’猕猴桃做接穗的试管内快繁嫁接体系，明确了利于提高诱导率、组织增殖、生根数量以及嫁接苗成活率等方面的各个参数，缩短了繁殖时间，延续了两个猕猴桃品种的优良性状，同时由于对嫁接环境参数的控制，嫁接苗成活率大大提高，提高了现有猕猴桃生产体系效率。CN109006475ACN109006475A权利要求书1/1页1.一种猕猴桃微嫁接方法，其特征在于，包括：(1)获取组培苗:(11)于4月取‘米良1号’猕猴桃当年生新稍茎段1.5-2.5cm，于3月取‘红阳’猕猴桃当年生新稍茎段1-1.5cm，然后分别进行灭菌处理；(12)将‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/L2,4-D的初代培养基中进行培养，将‘红阳’猕猴桃茎段于MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA的初代培养基中进行培养，诱导愈伤组织产生进而分化出幼芽；(13)将经过初代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.5mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖，将经过初代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.1mg/LGA3的继代培养基中进行培养增殖；(14)将经过继代培养的‘米良1号’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/LIBA+0.1wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，将经过继代培养的‘红阳’猕猴桃茎段于1/2MS+0.7mg/LIBA+0.5wt％活性炭的生根培养基中诱导生根，分别得到‘米良1号’猕猴桃组培苗和‘红阳’猕猴桃组培苗；(2)嫁接、培育：(21)选择建壮的‘米良1号’猕猴桃组培苗，切除生长不完全的顶部、基部以及叶片，保留中段1.8-2.2cm作为砧木；选择健壮的‘红阳’猕猴桃组培苗，切除基部和叶片，保留顶端0.8-1.2cm作为接穗，保持底端切口呈楔形斜面，斜面长度为0.4-0.6cm；(22)采用劈接法，将已经切割好的‘米良1号’砧木，从顶端向下劈切0.5-1.0cm，保持切口长度大于接穗的楔形切口长度，并且保持砧木和接穗的切口均平滑整齐；然后，将接穗插入砧木切口，保持切口严密接触，迅速用锡箔纸包裹切口，将砧木与接穗结合，获得嫁接苗；(23)将嫁接苗竖直插于1/2MS+1.0mg/LIBA+0.5mg/LGA3+40wt％蔗糖的嫁接培养基中培育，嫁接培养基的pH为5.8-6.2，然后用双层薄膜或塑料瓶盖将试管或组培瓶密封，置于20-30℃、光照1500-2000Lx、光照时间12-14h/d下培养40天。2.根据权利要求1所述的猕猴桃微嫁接方法，其特征在于，步骤(11)中，‘米良1号’猕猴桃茎段和‘红阳’猕猴桃茎段的灭菌方法为：采用70-80v％酒精溶液处理15-25s后，用0.05-0.15v％升汞溶液处理4-6min。3.根据权利要求2所述的猕猴桃微嫁接方法，其特征在于，采用75v％酒精溶液处理20s后，用0.1v％升汞溶液处理5min。4.根据权利要求1所述的猕猴桃微嫁接方法，其特征在于，步骤(22)中：嫁接培养基的pH为6。5.一种猕猴桃育苗方法，其特征在于，包括：根据权利要求1-4任一项所述的猕猴桃微嫁接方法获得猕猴桃嫁接苗；在炼苗移栽2周前，将装有嫁接苗的试管或组培瓶从组培室中取出，于室温下进行初步炼苗；然后在炼苗移栽1周前，先松开试管或组培瓶的双层薄膜或塑料瓶盖，1-2天后，再将试管管口或组培瓶瓶口部分敞开，然后在3-5天内将试管管口或组培瓶瓶口逐渐敞开直至全部敞开；炼苗完成后，用流水将嫁接苗根部洗净，然后移栽至土壤中培养；其中，土壤包括质量比为1:2:1的珍珠岩、泥炭土和蛭石。2CN10