基于ESR基因的与大白猪繁殖性状相关的分子标记及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109880920A(43)申请公布日2019.06.14(21)申请号201910342670.4(22)申请日2019.04.26(71)申请人四川农业大学地址611130四川省成都市温江区惠民路211号(72)发明人牛丽莉谢晶晶史可瑜仲涛朱砺(74)专利代理机构成都天汇致远知识产权代理事务所(普通合伙)51264代理人韩晓银(51)Int.Cl.C12Q1/6888(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表3页附图5页(54)发明名称基于ESR基因的与大白猪繁殖性状相关的分子标记及应用(57)摘要本发明公开了一种基于ESR基因的与大白猪繁殖性状相关的分子标记及应用。所述的分子标记位于猪ESR基因第3、6、8号外显子上，即，在3号外显子区域669bp处，记为g.669C>T，在6号外显子区域1296处，记为g.1296A>G，在8号外显子区域1665处和1755处，记为g.1665C>T和g.1755A>G。本发明还公开了上述的分子标记在猪种选育中的应用。本发明为猪的分子标记辅助选择提供了一种新的标记方法，为猪的分子育种提供了参考。CN109880920ACN109880920A权利要求书1/1页1.一种基于ESR基因的与大白猪繁殖性状相关的分子标记，其特征在于，所述的分子标记位于猪ESR基因第3、6、8号外显子上，即，在3号外显子区域669bp处，记为g.669C>T，在6号外显子区域1296处，记为g.1296A>G，在8号外显子区域1665处和1755处，记为g.1665C>T和g.1755A>G。2.用于检测权利要求1所述与猪繁殖性状相关的分子标记的引物组，其特征在于，所述引物组包括ESR-E3、ESR-E6和ESR-E8三组引物对，ESR-E3引物对的核苷酸序列为：正向引物F：5’-AGATTCTGACCGGCTAA-3’，如SEQIDNO.5所示；反向引物R：5’-CATGGTTACGGAATGGAA-3’，如SEQIDNO.6所示；ESR-E6引物对的核苷酸序列为：正向引物F：5’-CATTTGGAGCCAGTAGATT-3’，如SEQIDNO.7所示；反向引物R：5’-GATTGTGCCTTCAGAGC-3’，如SEQIDNO.8所示；ESR-E8引物对的核苷酸序列为：正向引物F：5’-GGGGCTTCTTGAACTGT-3’，如SEQIDNO.9所示；反向引物R：5’-GAAGTGCGACAGGGATT-3’，如SEQIDNO.10所示。3.含有权利要求2所述引物组的试剂或试剂盒。4.一种检测权利要求1所述的与大白猪繁殖性状相关的分子标记的方法，其特征在于，所述方法包括：以猪基因组DNA为模板利用权利要求2所述的引物组进行PCR扩增获得PCR产物；对所述PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR扩增反应体系为：2×TaqMasterMix15μL，DNA1.5μL，10μM上游引物1.5μL，10μM下游引物(10μM)1.5μL，ddH2O10.5μL。6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR扩增反应程序：94℃预变性1.5min；94℃变性20s，50-60℃退火20s，72℃延伸1kb/60s，循环30次；最后72℃再延伸5min，4℃保存。7.权利要求1所述的与大白猪繁殖性状相关的分子标记在猪种选育中的应用。2CN109880920A说明书1/6页基于ESR基因的与大白猪繁殖性状相关的分子标记及应用技术领域[0001]本发明属于动物分子标记育种领域，具体地说，涉及一种基于ESR基因的与大白猪繁殖性状相关的分子标记及应用。背景技术[0002]猪肉是当今世界上最主要的肉用经济动物之一，中国作为猪肉消费大国，猪的存栏量居世界第一。为提高生产效益，猪的繁殖性能一直是各大养殖企业关注的重要指标之一，其中猪的总产仔数和活产仔数尤为关键。[0003]分子标记辅助选择作为现代家畜育种工程中的一种重要手段，有效地避免传统中以表型为基础的育种手段的弊端，缩短了遗传间隔期，提高的选择准确性。分子标记辅助选择的前提是确定与所需表型性状相关的候选基因，有目的地对这些基因进行检测从而确定育种方向。[0004]雌激素(Estrogen)是促进雌性动物第二性征发育及性器官成熟的物质，属于类固醇激素类，由雌性动物卵巢和胎盘分泌产生，体内以雌二醇为主要表现形式，影响动物所有生殖相关的生理反应。[0005]雌激素受体基因(Estrogenreceptor，ESR)位于猪1号染色体的P24～P25区域内，含有8个外显子和7个内含子，同时可被分为A-F六个功能区域。其中A、B区