一种快速繁育淫羊藿试管苗的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111264393A(43)申请公布日2020.06.12(21)申请号202010242504.X(22)申请日2020.03.31(71)申请人南京农业大学地址210095江苏省南京市栖霞区八卦洲街道江苏省栖霞现代农业产业园区南京农业大学现代园艺产业科技创新中心(72)发明人向增旭张成才高真罗丽娜张子璇(74)专利代理机构北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司11385代理人朱玲艳(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种快速繁育淫羊藿试管苗的方法(57)摘要本发明提供了一种快速繁育淫羊藿试管苗的方法，涉及中药材栽培技术领域。该方法包括以下步骤：(1)将破除休眠的淫羊藿种子作为外植体接种于含链霉素或青霉素的缓冲培养基中培养，获得淫羊藿种胚；(2)利用淫羊藿种胚经愈伤组织诱导和增殖、丛生芽分化、丛生芽增殖、生根培养以及组培苗驯化后移栽入育苗基质中进行培养得到淫羊藿试管苗；所述丛生芽增殖以及生根培养承载培养基的培养装置采用气雾组培装置。本发明所述方法采用气雾培养，降低了淫羊藿试管苗污染率，显著提高了淫羊藿试管苗的移栽成活率，能够达到92％，有利于实现淫羊藿的规模化生产。CN111264393ACN111264393A权利要求书1/1页1.一种快速繁育淫羊藿试管苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将破除休眠的淫羊藿种子作为外植体接种于含链霉素或青霉素的缓冲培养基中培养，获得淫羊藿种胚；(2)利用淫羊藿种胚经愈伤组织诱导和增殖、丛生芽分化、丛生芽增殖、生根培养以及组培苗驯化后移栽入育苗基质中进行培养得到淫羊藿试管苗；所述丛生芽增殖以及生根培养承载培养基的培养装置采用气雾组培装置。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述破除休眠具体为：采用含有20mg/L氟啶酮和500mg/L赤霉素的溶液浸种24-36h后沙藏层积88-95天。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述链霉素或青霉素的浓度为链霉素0.1g/L或青霉素400mg/L。4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述缓冲培养基的配方为：MS+链霉素0.1g/L或青霉素400mg/L+琼脂7.0-7.5g/L+蔗糖25-30g/L，pH5.8-6.0。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导的培养基配方为：1/2MS+1.2-2.0mg/L6-BA+0.8-1.5mg/L2,4-D+0.1-0.5mg/LIBA+琼脂7.0-7.5g/L+蔗糖25-30g/L，pH5.8-6.0。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述丛生芽增殖的培养基配方为：MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生根培养的培养基配方为：1/2MS+NAA0.5mg/L+活性炭1.0g/L+蔗糖25-30g/L，pH5.8-6.0。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述丛生芽增殖以及生根培养的条件为：温度23℃-25℃，湿度75％-85％，光照14-16h/d，光照强度2000-2500Lx。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述育苗基质的体积比为草炭：珍珠岩：蛭石＝2:1:1。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述移栽入育苗基质中进行培养的条件为：光照强度为1500-3000lx，光照时间为10-14h/d，培养室温度为20-24℃。2CN111264393A说明书1/7页一种快速繁育淫羊藿试管苗的方法技术领域[0001]本发明涉及中药材栽培技术领域，具体涉及一种快速繁育淫羊藿试管苗的方法。背景技术[0002]淫羊藿(EpinediumLinn.)为小檗科淫羊藿属多年生草本植物，别名三枝九叶草、羊藿叶，仙灵脾，铁打杵等。根状茎粗短或横走，质硬、多须根，褐色；茎单生或数茎丛生，光滑，基部被有褐色鳞片，其茎叶入药，具有补肾壮阳、壮筋骨、祛风湿的功效。现代医学研究表明，淫羊藿中的主要有效成分--淫羊藿苷能够防治心脑血管疾病，提高免疫力，增强骨代谢，防止骨质疏松的发生。此外，其在抗肿瘤、抗氧化和抗衰老方面也有一定功效。除了药用价值之外，淫羊藿还具有奇特的姿态，叶和花具有较高的观赏价值，因此作为新型园林植物大力开发也很有前景。目前，淫羊藿作为药材主要依靠采挖野生资源，致使其在主要产地逐年减少，对资源和生态都破坏较大。积极开展淫羊藿的人工栽培和建立快速繁殖技术不仅能取得更好的经济效益，同时对生态的恢复也有促进作用。[0003]淫羊藿种子有明显的休眠现象，自然条件下约1年才能出苗，且出苗率低，主要是因为种胚的形态后熟并且种子内含有萌发抑制物质。目前报道的关