一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114467741A(43)申请公布日2022.05.13(21)申请号202210128689.0(22)申请日2022.02.11(71)申请人黑龙江省农业科学院耕作栽培研究所地址150000黑龙江省哈尔滨市松北区创新三路800号(72)发明人唐傲董文军刘猷红孟英来永才张喜娟孙兵夏天舒王立志谢婷婷(74)专利代理机构沈阳一诺君科知识产权代理事务所(普通合伙)21266专利代理师刘丽娟(51)Int.Cl.A01H1/02(2006.01)C12Q1/686(2018.01)权利要求书2页说明书11页附图14页(54)发明名称一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法(57)摘要本申请提供了一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法，包括：获取并种植转基因水稻和基因漂移受体，计算基因漂移受体的出芽率，并且进行取种，取种后培养得到杂交幼苗；根据外源基因设计特异性分子标记，并且通过特异性分子标记对杂交幼苗依次进行混池检测、分组检测和逐株检测；计算基因漂移频率。本申请采用区域模块混池取样方法，减少工作量，提高了工作效率。不受选择标记影响，当季收获后即可开展工作，并且本申请实际检测量均显著低于传统检测方法所需的检测量。综上可知，本申请能够解决传统转基因水稻基因漂移概率计算工作量大、耗时长而且基因漂移频率还受群体规模、盛花期风向和取样空间分布影响的问题。CN114467741ACN114467741A权利要求书1/2页1.一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法，所述转基因水稻携带外源基因，其特征在于，包括：获取并种植转基因水稻和基因漂移受体，待所述转基因水稻和基因漂移受体成熟后，计算所述基因漂移受体的出芽率，并且对成熟后的所述基因漂移受体进行取种，得到杂交种子，培养所述杂交种子，得到杂交幼苗；根据所述外源基因设计特异性分子标记，并且通过所述特异性分子标记对所述杂交幼苗进行混池检测，得到混池检测结果；如果所述混池检测结果检测出存在携带所述外源基因的杂交幼苗，对所述杂交幼苗进行分组并且进行分组检测，得到分组检测结果；如果所述分组检测结果检测出存在携带所述外源基因的杂交幼苗，对检测出携带所述外源基因的杂交幼苗所在的分组的所有杂交幼苗进行逐株检测，得到逐株检测结果；根据所述出芽率和逐株检测结果，计算基因漂移频率。2.根据权利要求1所述的一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法，其特征在于，所述获取并种植转基因水稻和基因漂移受体，待所述转基因水稻和基因漂移受体成熟后，计算所述基因漂移受体的出芽率，并且对成熟后的所述基因漂移受体进行取种，得到杂交种子，培养所述杂交种子，得到杂交幼苗的步骤包括：获取所述转基因水稻；设定基因漂移受体的类型和种类，并根据所述基因漂移受体的类型和种类获取基因漂移受体；设定田间排布规则，并根据所述田间排布规则种植所述转基因水稻和基因漂移受体；待所述转基因水稻和基因漂移受体成熟后，计算所述基因漂移受体的出芽率，并且对成熟后的所述基因漂移受体进行取种，得到杂交种子，培养所述杂交种子，得到杂交幼苗。3.根据权利要求2所述的一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法，其特征在于，所述基因漂移受体的类型包括非转基因常规水稻、非转基因水稻不育系、普通野生稻、杂草稻和近缘野生植物；以及，所述非转基因常规水稻的种类不少于6种，所述非转基因水稻不育系、普通野生稻、杂草稻和近缘野生植物的种类均不少于1种。4.根据权利要求2所述的一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法，其特征在于，所述田间排布规则包括：设定总种植区域，在所述总种植区域中划分转基因水稻区域和围绕所述转基因水稻区域设置的基因漂移受体区域；所述转基因水稻区域的设置形状为方形，所述转基因水稻区域的边长不少于10米；所述基因漂移受体区域的设置形状为方形；与所述转基因水稻区域边连式连接的所述基因漂移受体区域被均分成若干个与所述转基因水稻区域邻接的基因漂移单受体区域；所述基因漂移单受体区域的设置形状为长方形，所述基因漂移单受体区域的较短边的长度为1米并且与所述转基因水稻区域邻接，所述基因漂移单受体区域的较长边的长度为10米；每个所述基因漂移单受体区域均种植一个种类的所述基因漂移受体。5.根据权利要求4所述的一种关于无选择标记转基因水稻基因漂移频率的测定方法，2CN114467741A权利要求书2/2页其特征在于，所述总种植区域、转基因水稻区域和基因漂移受体区域的设置形状均为正方形；所述转基因水稻区域设置在所述在总种植区域中间；以及，所述基因漂移受体区域设置有4块，每块所述基因漂移受体区域均与所述转基因水稻区域的一条边邻接。6.根据权利要求4所述的一种关于无选择标记转基因水