一种利用草豆蔻茎尖快速繁育种苗的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114568307A(43)申请公布日2022.06.03(21)申请号202210292799.0(22)申请日2022.03.24(71)申请人中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所地址570000海南省海口市龙华区学院路4号(72)发明人李志英符运柳徐立(74)专利代理机构海口翔翔专利事务有限公司46001专利代理师莫臻(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种利用草豆蔻茎尖快速繁育种苗的方法(57)摘要本发明属于农业生物技术领域，涉及一种利用草豆蔻茎尖快速繁育种苗的方法，包括诱导分化不定芽、继代增殖、生根诱导、移栽和管理过程。本发明工艺流程简单，以笋芽或未开花的分蘖株的茎尖为外植体直接诱导分化不定芽，不定芽经过继代增殖形成丛芽、不定芽生根、移栽等过程，在短时间内获得大量可用于生产栽培的健康、优质种苗，周期短，且获得的种苗生理年龄一致，生长整齐，适合工厂化育苗和规模化栽培，解决人工种植对优良种苗的需求，对促进草豆蔻的开发利用及野生资源的保护起重要的作用。CN114568307ACN114568307A权利要求书1/1页1.一种利用草豆蔻茎尖快速繁育种苗的方法，其特征在于，包括诱导分化不定芽、继代增殖、生根诱导、移栽和管理过程，其步骤如下：1)诱导分化不定芽过程取草豆蔻的笋芽或未开花的分蘖株的茎尖为外植体，清洗消毒后接种于诱导培养基上诱导分化不定芽；所述诱导培养基是以WT为基本培养基，并添加6‑BA5.0～10.0mg/L、NAA0.5～1.0mg/L、蔗糖30g/L、卡拉胶6.5g/L，pH值为5.8；2)增殖培养过程将不定芽转接到增殖培养基上进行继代增殖培养形成丛芽；所述增殖培养基是以WT为基本培养基，并添加6‑BA3.0～5.0mg/L、NAA0.1～0.5mg/L、蔗糖30g/L、卡拉胶6.5g/L，pH值为5.8；3)诱导生根过程待丛芽长到3～4cm高时，切取单株，接种于生根培养基上诱导生根，获得完整植株；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加NAA0.1～1.0mg/L、蔗糖30g/L、卡拉胶6.5g/L，pH为5.8；4)移栽和管理过程A.移栽：将生根苗连瓶放置在控温大棚中炼苗，一周后将苗移出培养瓶外，洗净小苗根部的培养基，在600倍液的多菌灵溶液中浸泡30s～60s后，移栽到经多菌灵溶液消毒好的基质上；B.基质配比及处理：分别取草炭土、椰糠和河沙，按体积比计：草炭土：椰糠：河沙＝3:2:1的比例混匀，用多菌灵溶液淋透后盖上薄膜捂3～5d后揭开，用清水淋透后种苗；C.管理：移栽后7～10d内，覆盖薄膜保湿，基质湿度保持80％～90％，然后逐渐降低到70％；空气湿度90％以上，然后逐渐降低到60％～70％；遮阴60％～70％，然后逐渐减少到30％；D.施肥：待移栽的幼苗发新根后，晴天上午采用0.1％～0.2％尿素溶液进行叶面喷施，每7～15d施肥1次；E.病虫害防治：利用500倍多菌灵、500倍百菌清、800倍甲霜灵复合防病，利用菊酯类杀虫剂除虫。2CN114568307A说明书1/6页一种利用草豆蔻茎尖快速繁育种苗的方法技术领域[0001]本发明属于农业生物技术领域，涉及一种草豆蔻组织培养繁育种苗的方法，具体涉及一种利用草豆蔻茎尖快速繁育种苗的方法。该方法利用草豆蔻茎尖直接诱导分化不定芽，通过不定芽继代增殖、生根诱导、移栽等过程，获得大量种苗。背景技术[0002]草豆蔻(AlpiniakatsumadaiHayata)又名豆蔻、漏蔻、草果、豆蔻子、草蔻、大草蔻、偶子、草蔻仁、飞雷子、弯子等，为姜科山姜属植物，多年生草本，在中国海南、云南、广西均有栽培。其干燥种子入药，具有很高的药用价值和开发前景。[0003]进行草豆蔻的规模化人工种植，培育健康、优质的种苗是关键。现今，草豆蔻主要的育苗方式是种子繁殖或分株繁殖。播种育苗，一则种子必须采随收随播种，季节限制明显；二则草豆蔻种子是产品器官，播种育苗耗费成本较高；三则种子萌发率低，据王俊(2017)研究表明种子无菌萌发率最高只有48.33％；四则播种过程也比较繁琐，播种前需要先将果皮剥去，清水浸泡，然后用粗沙与种子充分搓擦洗净果肉后方可使用。分株繁殖，一方面繁殖效率较低，种苗不整齐；另一方面容易携带病虫害，加剧病虫害的传播蔓延，种苗质量堪忧。因此，播种育苗和分株繁殖都不是草豆蔻种苗批量繁殖的理想方法。[0004]植物组织培养具有原材料需求量少、不受时间和地点限制、繁殖系数高、可保持母本优良性状等特点，在植物种苗繁育上广泛应用。为加速草豆蔻优良品种推广种植，有必要建立能高效、稳定扩繁草豆蔻健康优质组培种苗的生产技术体系。[