OsABA8ox2基因在调控弱势粒灌浆、提高种子耐老化及幼苗耐冷性的应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114990130A(43)申请公布日2022.09.02(21)申请号202110740333.8(22)申请日2021.07.01(71)申请人湖南农业大学地址410128湖南省长沙市芙蓉区农大路1号(72)发明人叶能辉滕振宁段美娟郑芹张建华(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569专利代理师苏士莹(51)Int.Cl.C12N15/29(2006.01)C07K14/415(2006.01)C12N15/82(2006.01)A01H5/10(2018.01)A01H6/46(2018.01)权利要求书1页说明书8页序列表5页附图4页(54)发明名称OsABA8ox2基因在调控弱势粒灌浆、提高种子耐老化及幼苗耐冷性的应用(57)摘要本发明涉及基因编辑领域，特别是涉及OsABA8ox2基因在调控弱势粒灌浆、提高种子耐老化及幼苗耐冷性的应用。OsABA8ox2基因在作为基因编辑水稻的靶标基因中的应用，所述OsABA8ox2基因的核苷酸序列如SEQIDNo:2所示。本发明通过敲除OsABA8ox2基因，使OsABA8ox2基因不能正常表达，能够达到调控水稻弱势粒灌浆，提高种子耐老化及幼苗耐冷性的效果。CN114990130ACN114990130A权利要求书1/1页1.OsABA8ox2基因在作为基因编辑水稻的靶标基因中的应用，其特征在于，所述OsABA8ox2基因的核苷酸序列如SEQIDNo:2所示。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述核苷酸序列还包括与权利要求1所述的OsABA8ox2基因具有80％以上同一性的核苷酸序列。3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述OsABA8ox2基因的编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNo:1所示。4.一种靶向敲除或沉默OsABA8ox2基因的sgRNA序列，其特征在于，所述sgRNA序列的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。5.一种靶向敲除或沉默OsABA8ox2基因的CRISPR/Cas9载体，其特征在于，所述CRISPR/Cas9载体中含有权利要求4所述sgRNA序列。6.抑制OsABA8ox2基因表达在如下中的应用，其特征在于，所述应用包括：a：调控水稻弱势粒灌浆，b为提高种子耐老化，c为幼苗耐冷性。7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述抑制的方法包括RNAi干扰、基因定点编辑、同源重组或CRISPR/Cas9基因敲除。8.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述应用的方法为向水稻中导入权利要求5所述CRISPR/Cas9载体。2CN114990130A说明书1/8页OsABA8ox2基因在调控弱势粒灌浆、提高种子耐老化及幼苗耐冷性的应用技术领域[0001]本发明涉及基因编辑领域，特别是涉及OsABA8ox2基因在调控弱势粒灌浆、提高种子耐老化及幼苗耐冷性的应用。背景技术[0002]中国是全球最大的水稻生产者和消费者，上世纪70年代利用植物杂种优势培育出的杂交水稻，使我国水稻总产量从60年代到90年代增长了接近4.5倍，我国实现了凭借仅占世界总量7％的耕地面积以及5％的水资源，却养活了占世界总量超过20％人口的目标。但是，全球人口的增长却始终对粮食产量提出新的挑战。强、弱势粒灌浆差异在禾谷类作物中普遍存在，其中水稻大穗型品种以及在高氮种植环境下这一差异表现的更为明显。例如超级稻强势粒的结实率和千粒重分别比弱势粒高出20.7％和7.2g，而常规稻则分别为6.3％和3.0g，从而导致在灌浆效率上超级稻的灌浆率要明显低于常规稻的灌浆率，综上，强、弱势粒灌浆差异对水稻产量形成有着不可忽视的影响弱势粒灌浆差已成为制约水稻发挥高产潜力的主要原因之一。[0003]种子活力直接影响着幼苗的生长状况，水稻种子在储藏过程中其活力会逐渐下降，每年我国因种子老化而造成巨大的经济损失。此外，更为严重的是，老化后的种子，种子活力降低，发芽率下降；而且水稻起源于热带及亚热带地区，对冷胁迫尤为敏感。高纬度及高海拔地区的低温严重制约了水稻的生产，此外，长江中下游稻区早稻季的倒春寒，这一极端低温天气，对早稻生产影响很大，尤其是对直播早稻生产限制颇多。因此提高种子耐老化抗性对种子储藏和幼苗的耐寒能力对农业生产具有重要意义。发明内容[0004]为了解决上述问题，本发明提供了OsABA8ox2基因在调控弱势粒灌浆、提高种子耐老化及幼苗耐冷性的应用。本发明通过敲除OsABA8ox2基因，使OsABA8ox2蛋白质不能正常表达，能够达到调控水稻弱势粒灌浆，提高种子耐老化及幼苗耐冷性的效果。[0005]为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：[0006]本发明提供了OsABA8ox2基因在作为基因编辑水稻的靶标基因中的应用，所述OsABA