与绵羊生长性状相关的分子标记、其检测方法及应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115181804A(43)申请公布日2022.10.14(21)申请号202210655356.3(22)申请日2022.06.10(71)申请人甘肃农业大学地址730070甘肃省兰州市安宁区营门村1号(72)发明人张小雪李发弟王维民赵利明张德印李晓龙赵源张煜坤许丹程江博王江荟李文馨林长春(74)专利代理机构北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙)11498专利代理师王加岭杨静(51)Int.Cl.C12Q1/6888(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表2页附图2页(54)发明名称与绵羊生长性状相关的分子标记、其检测方法及应用(57)摘要本发明提供了一种与绵羊生长性状相关的分子标记、其检测方法及应用。本发明通过对绵羊ALB基因进行PCR扩增和序列分析，发现在扩增片段的第558位存在一个A/T多态性位点，进一步使用KASPar引物对1271只绵羊的多态性位点进行检测和建立最小二乘模型，对基因型与生长性状进行关联分析，最终确定了本发明扩增的ALB基因片段可以作为与绵羊平均日增重相关的分子标记。本发明通过检测分子标记，可用于选留基因为TT纯合型绵羊进入核心群作为种羊，以改善绵羊的生长性状，有助于增加经济效益。CN115181804ACN115181804A权利要求书1/1页1.一种与绵羊生长性状相关的分子标记，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，其中第558bp处的W表示A或T，该突变导致分子标记的A/T多态性。2.一种检测权利要求1所述的分子标记的PCR引物对，其特征在于，其包括核苷酸序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示序列。3.一种检测权利要求1所述的分子标记的KASPar引物对，其特征在于，所述KASPar引物对包括核苷酸序列如SEQIDNO.4所示的正向引物1，如SEQIDNO.5所示的正向引物2和如SEQIDNO.6所示的通用反向引物C。4.一种检测权利要求1所述的分子标记的试剂盒，其特征在于，其包含权利要求2的PCR引物对或权利要求3所述的KASPar引物对。5.一种检测权利要求1所述的分子标记的方法，其包括如下步骤：a)使用权利要求2的PCR引物对或权利要求3所述的KASPar引物对，或者使用权利要求4所述的试剂盒，对绵羊基因组DNA进行扩增；b)对步骤a)获得扩增产物的多态性位点进行分型鉴定。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤b)中的分型鉴定方法为测序法、荧光探针法、基因芯片法或高分辨率溶解曲线法。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，利用权利要求3所述的KASPar引物对进行PCR扩增，扩增结束后，再通过检测荧光信号确定分型结果。8.权利要求1所述的分子标记及其多态性位点、或权利要求2或3所述的引物对，或权利要求4所述的试剂盒，或权利要求5‑7任一项所述的方法在绵羊生长性状检测中的应用。9.权利要求1所述的分子标记及其多态性位点、或权利要求2或3所述的引物对，或权利要求4所述的试剂盒，或权利要求5‑7任一项所述的方法在绵羊育种中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，其育种目的是为挑选出快速生长型绵羊。2CN115181804A说明书1/5页与绵羊生长性状相关的分子标记、其检测方法及应用技术领域[0001]本发明属于分子标记的技术领域，具体涉及ALB基因片段作为影响绵羊生长性状的分子标记、其检测方法及应用。背景技术[0002]白蛋白(ALB)是最丰富的循环蛋白，该蛋白对多种内源性分子(包括脂肪酸、激素和代谢物)起着载体蛋白的作用。在人类中，一些研究表明，ALB水平与体脂百分比呈负相关(Chang，Xu，Ferrante，&Krakoff，2019)，妊娠晚期母体血清ALB比率降低将影响孕妇的婴儿出生体重，并且存在正相关(Wadaetal.，2021)。此外，有一份报告表明，鸭ALB基因与FCR和RFI呈强负相关。但是ALB与绵羊的生长性状是否相关，或有什么关联并不清楚。[0003]绵羊产业是现代畜牧业的重要组成部分，可以为毛纺产业生产原料，提高人民的经济收入。随着人们生活水平的普遍提高，羊肉因其低胆固醇、瘦肉、高营养、嫩滑而广受欢迎(Hehuaetal.，2020)。[0004]本发明通过对ALB基因进行测序和分析，探讨其不同基因型与绵羊生长性状的关联性，旨在为提高绵羊生长性状的遗传改良方面提供基因素材，加速优质肉羊的培育进程。发明内容[0005]为了解决上述技术问题，本发明提供一种作为与绵羊生长性状相关的分子标记及其应用。本发明的分子标记是从绵羊ALB基因中扩增得到，其具体核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。通过扩增绵羊ALB基因的DNA序列并测