马铃薯疮痂病抗性评价方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115747293A(43)申请公布日2023.03.07(21)申请号202211478083.6(22)申请日2022.11.23(71)申请人云南农业大学地址650225云南省昆明市盘龙区金黑公路95号(72)发明人于德才张红骥杜魏甫罗山吴贵泽(74)专利代理机构杭州寒武纪知识产权代理有限公司33271专利代理师王统贵(51)Int.Cl.C12Q1/06(2006.01)C12Q1/18(2006.01)A01H1/04(2006.01)C12R1/645(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图2页(54)发明名称马铃薯疮痂病抗性评价方法(57)摘要本发明公开了马铃薯疮痂病抗性评价方法，其特征在于：包括以下五个步骤。本发明马铃薯疮痂病抗性评价方法，能够根据多组样品进行对照，使马铃薯的品种的抗性能够直观的进行检测，通过实验数据，同时能够根据多种马铃薯的品种能够直接进行实验，建立了一种可靠、结果稳定的适于马铃薯疮痂病抗性鉴定评价方法，能够在进行使用的过程中能够更加方便，使检测的结果能够更加直观,通过对照组能够检测马铃薯本身内部是否含有疮痂病抗病菌，同时能够检测疮痂病病菌是否具有活性，能够使检测的过程中更加方便，能够直接的进行对照，操控性强的马铃薯疮痂病抗性鉴定新方法，以更好地进行抗疮痂病马铃薯资源评价及进行快速准确的筛选和鉴定。CN115747293ACN115747293A权利要求书1/1页1.马铃薯疮痂病抗性评价方法，其特征在于：包括以下五个步骤：步骤一：所述根据实验预选两种待鉴定的马铃薯，选择两类品种不一样的马铃薯，生长健康的马铃薯，扩繁后备用；步骤二：所述获取疮痂病菌并进行活化，收集新鲜疮痂病病样，在室温条件下，黑暗环境中进行培养培养基平板上生长出疮痂病病原菌菌丝体后，用于接种体制备；步骤三：所述对活化后的疮痂病菌进行接种体的制备，将步骤二中菌丝体在平板上扩繁，并在常温黑暗条件下进行预培养一周；步骤四：所述病菌与马铃薯进行人工接种，通过进行人工喷雾接种的方式对实验组中的两类马铃薯进行接种操作，观察后进行抗病评价；步骤五：所述对马铃薯品种的抗病进行评价，根据接种的时间分别观察两种马铃薯的感染情况然后计算每个马铃薯的病情指数，根据病情指数进行抗性评价。2.根据权利要求1所述的马铃薯疮痂病抗性评价方法，其特征在于：所述选择两类品种不一样的马铃薯，两类马铃薯需要无疮痂病病况，生长健康的马铃薯，置于在潮湿环境中，同时喷洒培养，使马铃薯能够生根，并将生根后的两类马铃薯进行分组，扩繁后备用。3.根据权利要求1所述的马铃薯疮痂病抗性评价方法，其特征在于：所述收集新鲜疮痂病病样，通过细胞繁殖的方法获得具有致病力的疮痂病病原菌、扩繁待用，将具有致病力的疮痂病病原菌接种至培养基平板上，在室温条件下，黑暗环境中进行培养培养基平板上生长出疮痂病病原菌菌丝体后，用于接种体制备。4.根据权利要求1所述的马铃薯疮痂病抗性评价方法，其特征在于：所述将步骤二中菌丝体在平板上扩繁，生长一周后，加入灭菌水，使菌丝和孢子溶解于灭菌水中生成菌悬液，将菌悬液涂布于培养基平板上，并在常温黑暗条件下进行预培养一周，将涂布于培养基平板上的菌悬液，通过进行人工喷雾接种的方式对实验组中的两类马铃薯进行接种操作，实验组不做处理进行正常种植，在接种后每天观察，进行抗病评价。5.根据权利要求1所述的马铃薯疮痂病抗性评价方法，其特征在于：所述在两类马铃薯开始发病情况开始，根据接种的时间分别观察两种马铃薯的感染情况，随机在两类马铃薯中同时选择十株进行发病严重度调查，然后计算每个马铃薯的病情指数，根据病情指数进行抗性评价；其中，发病严重度分级标准如下：I级：无症状，健康II级：0<病斑面积<5％，茎根部分有少数病斑，但是根茎能够正常进行生长；III级：12.5％<病斑面积≤25％，茎根部分轻度损伤，表面病斑面积较小；IV级：25％<病斑面积≤50％，茎根部分腐烂严重，且马铃薯表面腐烂；V级：50％<病斑面积，分枝蔓病斑密布、枯死或叶片变黄脱落。2CN115747293A说明书1/4页马铃薯疮痂病抗性评价方法技术领域[0001]本发明涉及马铃薯疮痂病抗性评价技术领域，具体为马铃薯疮痂病抗性评价方法。背景技术[0002]马铃薯粉痂病是马铃薯生产上的一种重要土传病害，难以被彻底治愈。该病能导致块茎质量和产量降低，商品薯品质下降，严重影响马铃薯产业的发展，马铃薯粉痂病主要危害马铃薯的块茎和根部，块茎染病初在表皮上现针头大的褐色小斑，外围有半透明的晕环，后小斑逐渐隆起、膨大，成为直径3‑5毫米的水泡状斑点，病情发展后期或干燥条件下，可散出大量深褐色粉状物，斑块下陷呈火山口状，外围有木栓质晕环，主要与土壤理化性质、品种抗性以