多功能复合降镉促生长微生物菌剂及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115747102A(43)申请公布日2023.03.07(21)申请号202211337012.4C05G3/00(2020.01)(22)申请日2022.10.28C05G3/80(2020.01)C12R1/01(2006.01)(71)申请人浙江省地质调查院地址310000浙江省杭州市萧山区萧金路508号申请人中国地质大学（武汉）(72)发明人卢新哲余岳黄春雷李平潘卫丰孙瑞何丽(74)专利代理机构武汉知产时代知识产权代理有限公司42238专利代理师孔灿(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C12N1/38(2006.01)C12N1/02(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图2页(54)发明名称多功能复合降镉促生长微生物菌剂及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了多功能复合降镉促生长微生物菌剂及其制备方法和应用。方法包括如下步骤：S1:微生物发酵液的制备：配置发酵培养液；S2:微生物的扩大培养：功能菌剂的扩大培养：将耐镉微生物菌群、解磷菌群、硒酸盐还原菌群、硫酸盐还原菌群按照1：1：1：1的比例添加到发酵培养液中，总接种量为2％；辅助菌剂的扩大培养：将植物促生长菌剂按照2％的接种量单独接种到发酵培养液中；S3:微生物菌剂的制备：待上述两个发酵液发酵培养18h后，将投入生物质材料进行混合，混合后，待其自然稳定到24h，完成菌剂的制作。本发明的微生物菌剂一方面降低土壤重金属镉的毒害作用，另一方面通过植物促生长微生物菌剂改善农作物的生长状况。CN115747102ACN115747102A权利要求书1/1页1.一种多功能复合降镉促生长微生物菌剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1:微生物发酵液的制备：配置发酵培养液；S2:微生物的扩大培养：功能菌剂的扩大培养：将耐镉微生物菌群、解磷菌群、硒酸盐还原菌群、硫酸盐还原菌群按照1：1：1：1的比例添加到发酵培养液中，总接种量为2％；辅助菌剂的扩大培养：将植物促生长菌剂按照2％的接种量单独接种到发酵培养液中；S3:微生物菌剂的制备：待上述两个发酵液发酵培养18h后，将投入生物质材料进行混合，混合后，前8个小时，每隔2小时对菌剂进行搅拌，使得混合物内各组分状态均一，8小时后，待其自然稳定到24h，完成菌剂的制作。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤S3中，功能菌剂的发酵培养液和辅助菌剂的发酵培养液混合的体积比为1‑4:1。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤S3中，生物质材料与混合的发酵培养液的固液比为1g:2‑10mL。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：植物促生长菌的富集过程如下：称取新鲜土壤置于装有无菌水中振荡，静置后取上清液制得土壤菌悬液；使用植物促生长培养基对土壤菌悬液进行富集，得到目的富集产物。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：植物促生长培养基成分如下，甘露醇10g/L；CaSO40.20g/L；K2HPO40.20g/L；CaCO35g/L；MgSO40.20g/L；NaMoO4·2H2O20ul/L；NaCl0.02g/L；FeCl320ul/L。6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：耐镉微生物菌群的富集过程如下：制备菌悬液，好氧菌群土壤菌悬液制备方式如下：称取新鲜土壤置于装有无菌水中振荡，静置后取上清液制得好氧菌群土壤菌悬液；好氧菌群土壤菌悬液使用牛肉膏蛋白胨培养基在Cd2+为5mg/L的条件下进行富集，转接三代后得到目的富集产物耐镉微生物菌群；解磷菌群的富集过程如下：取上述好氧菌群土壤菌悬液加入到解磷培养基中，进行解磷功能菌群的富集，获取得到解磷富集产物，而后再传代转接两次获得第三代的富集产物解磷菌群；亚硒酸盐还原菌群的富集过程如下：使用TSB培养基进行好氧菌群土壤菌悬液的富集，转接三代后得到目的富集产物亚硒酸盐还原菌群；硫酸盐还原菌群的富集过程如下：厌氧菌群土壤菌悬液制备方式如下：在厌氧手套箱中取土壤样品中间部分装入无菌离心管中，加入无菌水，充分振荡后静置，取上清液制得厌氧土壤菌悬液；厌氧菌群土壤菌悬液使用硫酸盐还原菌培养基在镉浓度5mg/L条件下进行富集，得到目的富集产物硫酸盐还原菌群。7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述配置发酵培养液为牛肉膏：3g、蛋白胨：10g、氯化钠：5gpH：7.4‑7.6。8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：生物质材料包括稻壳粉。9.一种采用权利要求1‑8任一项所述制备方法制备的多功能复合降镉促生长微生物菌剂。10.如权利要求9所述的多功能复合降镉促生长微生物菌剂的应用，其特征在于：用于降低土壤中有效态镉含量和促进植物生长。2CN115747102A说明书1/6页多功能复