鱼类蛋白自组装纳米抗原及其制备的疫苗与应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115850516A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211434461.0A61P31/14(2006.01)(22)申请日2022.11.16B82Y5/00(2011.01)B82Y40/00(2011.01)(71)申请人西北农林科技大学地址712000陕西省咸阳市杨凌示范区邰城路3号(72)发明人朱斌王高学张晨赵昭(74)专利代理机构西安鼎迈知识产权代理事务所(普通合伙)61263专利代理师刘喜保(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)A61K39/205(2006.01)A61K39/15(2006.01)A61K39/385(2006.01)权利要求书1页说明书9页序列表（电子公布）附图6页(54)发明名称鱼类蛋白自组装纳米抗原及其制备的疫苗与应用(57)摘要本发明公开了鱼类蛋白自组装纳米抗原及其制备的疫苗与应用。本发明所提供的包含融合蛋白的纳米抗原，所述融合蛋白由斑马鱼铁蛋白H亚基和抗原蛋白连接得到；所述斑马鱼铁蛋白H亚基的N端和所述抗原蛋白的C端通过连接肽连接得到；所述抗原蛋白选自鲤春病毒血症抗原蛋白、草鱼呼肠孤病毒抗原蛋白或鲈鱼弹状病毒抗原蛋白。发明以鱼类自身铁蛋白和抗原蛋白序列进行串联后经大肠杆菌原核表达，制备得到表面展示抗原蛋白的纳米球状粒子，通过浸泡方式可引起鱼体产生广泛中和性抗体，提高了免疫效力，可有效预防鲤春病毒血症、草鱼出血病、鲈鱼弹状病毒病等水产疾病。本发明疫苗制备方法安全、简便，适合进行快速大规模生产。CN115850516ACN115850516A权利要求书1/1页1.一种包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述融合蛋白由斑马鱼铁蛋白H亚基和抗原蛋白连接得到；所述斑马鱼铁蛋白H亚基的N端和所述抗原蛋白的C端通过连接肽连接得到；所述抗原蛋白选自鲤春病毒血症抗原蛋白、草鱼呼肠孤病毒抗原蛋白或鲈鱼弹状病毒抗原蛋白。2.根据权利要求1所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述鱼类自身铁蛋白为斑马鱼铁蛋白H亚基，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。3.根据权利要求1所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述连接肽的氨基酸序列如SEQIDNO：5所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：6所示。4.根据权利要求1～3中任一所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述鲤春病毒血症抗原蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：3所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示。5.根据权利要求4所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述融合蛋白为含鲤春病毒血症抗原蛋白和斑马鱼铁蛋白的融合蛋白，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：7所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：8所示。6.根据权利要求1～3中任一所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述草鱼呼肠孤病毒抗原蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：9所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：10所示。7.根据权利要求6所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述融合蛋白为含草鱼呼肠孤病毒抗原蛋白和斑马鱼铁蛋白的融合蛋白，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：11所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：12所示。8.根据权利要求1～3中任一所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述鲈鱼弹状病毒抗原蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：13所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：14所示。9.根据权利要求8所述的包含融合蛋白的纳米抗原，其特征在于：所述融合蛋白为含鲈鱼弹状病毒抗原蛋白和斑马鱼铁蛋白的融合蛋白，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：15所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：16所示。10.权利要求1～9中任一所述的包含融合蛋白的纳米抗原在制备预防水产疾病的疫苗中的应用。2CN115850516A说明书1/9页鱼类蛋白自组装纳米抗原及其制备的疫苗与应用技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，特别地涉及鱼类蛋白自组装纳米抗原及其制备的疫苗与应用。背景技术[0002]近年来，我国已成为世界上最大的水产品生产国和消费国，2020年全国水产养殖产量已达5224.2万吨。人们对水产品的需求量处于逐年增长态势，直接推动了水产养殖业的快速发展，极大地促进了水产养殖业经济发展。而水产病毒性疾病是水产养殖业危害最大的一类疾病，具有发病急、传播快、治疗难、死亡率高和危害大等特点。水产病毒性疾病具有宿主感染范围广、发病急和死亡率高等特点，可以感染几乎所有的鲤科鱼类，患病幼鱼的死亡率在90％以上。因此，水产病害防控已