一种可提高作物赤霉素含量的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115843564A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211443361.4A01N63/22(2020.01)(22)申请日2022.11.18A01N63/10(2020.01)A01P21/00(2006.01)(71)申请人中国热带农业科学院环境与植物保C12R1/11(2006.01)护研究所地址570100海南省海口市龙华区学院路4号(72)发明人余小兰李晓亮李勤奋李光义彭实亮(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限公司44202专利代理师王美燕(51)Int.Cl.A01G7/06(2006.01)A01G22/15(2018.01)C12N1/20(2006.01)权利要求书2页说明书9页(54)发明名称一种可提高作物赤霉素含量的方法(57)摘要本发明提供一种可提高作物赤霉素含量的方法，主要步骤为在培养基中添加蚯蚓提取液配制成改良型巨大芽孢杆菌菌悬液，然后将改良型巨大芽孢杆菌菌悬液接种于作物上。本发明不外源添加赤霉素，仅通过巨大芽孢杆菌及蚯蚓提取液的互作效应，诱导作物体内赤霉素合成，从而提高作物赤霉素含量。CN115843564ACN115843564A权利要求书1/2页1.一种可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，在培养基中添加蚯蚓提取液配制成改良型巨大芽孢杆菌菌悬液，然后将改良型巨大芽孢杆菌菌悬液接种于作物上。2.根据权利要求1所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，蚯蚓提取液的提取步骤包括：(1)将蚯蚓饥饿培养6‑8小时；(2)将蚯蚓放入水中，之后依次加入木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和微生物产酸性蛋白酶，调节pH，常温发酵至少24小时，得到蚯蚓粗提液；(3)将获得的蚯蚓粗提液离心，取上清液，之后依次加入甘氨酸、L‑亮氨酸、L‑苏氨酸、L‑色氨酸，搅拌均匀，即为蚯蚓提取液。3.根据权利要求2所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和微生物产酸性蛋白酶的质量比为1:1:1.5‑2，且添加比例为总物料质量的0.8‑1.2％。4.根据权利要求2所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，甘氨酸、L‑亮氨酸、L‑苏氨酸、L‑色氨酸质量比为1:1:1:1.5‑2.5，且添加比例为游离氨基酸总质量的40‑50％。5.根据权利要求1所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，所述蚯蚓为以牛粪为食的赤子爱胜蚓一代繁殖后的蚯蚓。6.根据权利要求1所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，蚯蚓提取液的提取步骤包括：(1)将蚯蚓按每平方米5公斤的密度投放入盒中，调节室内温度23℃，饥饿培养6小时，之后将蚯蚓取出；(2)将洗干净的蚯蚓放入去离子水中，蚯蚓与去离子水的质量比为2.5:1，之后依次加入质量比为1:1:1.5‑2的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和微生物产酸性蛋白酶，蛋白酶添加比例为总物料质量的0.8‑1.2％，调节pH值至7，常温发酵24小时，期间每隔8小时搅拌一次，得到蚯蚓粗提液；(3)将获得的蚯蚓粗提液放入离心机中，以转速2000转/分离心10分钟，取上清液；之后依次加入质量比为1:1:1:1.5‑2.5的甘氨酸、L‑亮氨酸、L‑苏氨酸、L‑色氨酸，确保蚯蚓提取液中甘氨酸、L‑亮氨酸、L‑苏氨酸、L‑色氨酸总量占游离氨基酸总质量的40‑50％，搅拌均匀，即为蚯蚓提取液。7.根据权利要求1所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，所述改良型巨大芽孢杆菌菌悬液的配制步骤包括：(1)在无菌条件下，将巨大芽孢杆菌接种至LB培养基上，28‑30℃下培养；之后挑取单菌落接种至LB液体培养基中，28‑30℃，200‑220r/min下振荡培养至少24h，镜检，确保菌悬液浓度大于1×109cfu/ml，即得菌悬液；(2)在菌悬液中添加蚯蚓提取液，添加比例为培养基总量的1‑2％，搅拌均匀，放置恒温培养箱中，28‑30℃培养至少8小时，镜检，确保菌悬液浓度大于1×108cfu/ml，即为改良型巨大芽孢杆菌菌悬液。8.根据权利要求1所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，所述改良型巨大芽孢杆菌菌悬液接种时期分为两次，第一次于作物播种时接种，在作物出芽后14‑16天，接2CN115843564A权利要求书2/2页种第二次。9.根据权利要求1所述的可提高作物赤霉素含量的方法，其特征在于，所述作物包括白菜。3CN115843564A说明书1/9页一种可提高作物赤霉素含量的方法技术领域[0001]本发明涉及植物生长调节剂技术领域，具体涉及一种可提高作物赤霉素含量的方法。背景技术[0002]赤霉素(Gibberellins，GA)是一种常见的植物生长调节剂，其化学结构属于二萜类的化合物。赤霉素在高等植物、细菌以及真菌中