小麦-长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115843677A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211603429.0(22)申请日2022.12.13(71)申请人山东农业大学地址271000山东省泰安市岱宗大街61号(72)发明人孔令让李学峰宣宇李冬(74)专利代理机构北京中知慧专利代理事务所(普通合伙)11969专利代理师卜爱华(51)Int.Cl.A01H1/02(2006.01)A01H1/04(2006.01)A01H1/00(2006.01)C12Q1/6895(2018.01)C12Q1/6841(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表（电子公布）附图2页(54)发明名称小麦-长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法及其应用(57)摘要本发明属于小麦遗传育种领域，公开了一种小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法及其应用。本发明公开了小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系以及遗传改良系的创制方法，本发明还公开了小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系中与小麦抗茎基腐病基因Fhb7紧密连锁的分子标记K‑7396。本发明结合分子标记辅助选择、原位杂交鉴定技术和茎基腐病抗性鉴定，打破了Fhb7与PSY‑E2的连锁，易位系不仅保持了稳定的茎基腐病抗性，而且面粉色泽呈现白色，可以更好地在生产上推广应用。CN115843677ACN115843677A权利要求书1/1页1.一种小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法，其特征在于步骤如下：(1)以携带Fhb7的小麦‑长穗偃麦草短片段易位系SDAU2028为父本，以中国春ph1b突变体CSph1b为母本，杂交获得F1；(2)F1与CSph1b回交，从BC1F1代植株中提取基因组DNA，利用ph1b基因的特异分子标记Xpsr128、Xpsr574和XAWJL3以及与Fhb7紧密连锁的7el2特异分子标记Xcfa2240和XsdauK66进行检测；筛选到ph1b基因纯合而Fhb7基因杂合的单株，这些单株自交后获得若干BC1F2代植株并全部提取基因组DNA；(3)利用上述与Fhb7紧密连锁的7el2特异分子标记Xcfa2240以及PSY‑E2的功能标记K‑PSY对BC1F2代植株进行基因分型，筛选携带长穗偃麦草抗茎基腐病基因Fhb7而不含黄色素基因PSY‑E2的小麦‑长穗偃麦草短片段易位系，自交纯合；(4)PCR扩增反应产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳以及琼脂糖凝胶电泳分析纯合体的基因型；(5)进行荧光原位杂交鉴定。2.根据权利要求1所述易位系的创制方法，其特征在于，步骤(2)中所述分子标记如下：Xpsr128，正向引物P1，序列为SEQIDNO.1；反向引物P2，序列为SEQIDNO.2；Xpsr574，正向引物P3，序列为SEQIDNO.3；反向引物P4，序列为SEQIDNO.4；XAWJL3，正向引物P5，序列为SEQIDNO.5；反向引物P6，序列为SEQIDNO.6；Xcfa2240，正向引物P7，序列为SEQIDNO.7；反向引物P8，序列为SEQIDNO.8；XsdauK66，正向引物P9，序列为SEQIDNO.9；反向引物P10，序列为SEQIDNO.10；步骤(3)中所述分子标记如下：K‑PSY，正向引物P11，序列为SEQIDNO.11；反向引物P12，序列为SEQIDNO.12。3.权利要求1或2所述方法创制的含有小麦抗茎基腐病基因Fhb7的小麦‑长穗偃麦草短片段易位系在小麦抗茎基腐病育种中的应用。4.小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系中与小麦抗茎基腐病基因Fhb7紧密连锁的分子标记K‑7396，其特征在于：其正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.13所示；其反向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.14所示。5.权利要求4所述的分子标记K‑7396在小麦抗茎基腐病育种中的应用。6.权利要求4所述的分子标记K‑7396在检测目标株系是否携带Fhb7中的应用。7.一种携带小麦抗茎基腐病基因Fhb7的遗传改良系的创制方法，其特征在于：以权利要求1或2创制的小麦‑长穗偃麦草短片段易位系为Fhb7的供体亲本，以我国主栽小麦品种为轮回亲本，连续回交2次后自交6次，并利用权利要求4所述的与Fhb7紧密连锁的分子标记K‑7396进行辅助选择鉴定，保留携带Fhb7的单株；获得了遗传改良系。8.权利要求6所述的遗传改良系在小麦抗茎基腐病育种中的应用。2CN115843677A说明书1/6页小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法及其应用技术领域[0001]本发明属于小麦遗传育种领域，具体涉及小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法及其应用。背景技术[0002]小麦是