蛋白融合标签及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115948359A(43)申请公布日2023.04.11(21)申请号202210917466.2C07K19/00(2006.01)(22)申请日2022.08.01C12N9/04(2006.01)C12R1/19(2006.01)(71)申请人华南农业大学地址510642广东省广州市天河区五山华南农业大学(72)发明人王海洪罗丽祯张文彬马金成胡喆(74)专利代理机构北京新科华领知识产权代理事务所(普通合伙)16115专利代理师吴变变(51)Int.Cl.C12N9/06(2006.01)C12N15/53(2006.01)C12N15/70(2006.01)C12N1/21(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表（电子公布）附图4页(54)发明名称蛋白融合标签及其应用(57)摘要本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种蛋白融合标签及其应用。该蛋白融合标签包括如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2所示序列。该蛋白融合标签可以有效提高目的蛋白的表达量以及提高目的蛋白的水溶性，而且不会影响目的蛋白的活性。CN115948359ACN115948359A权利要求书1/1页1.蛋白融合标签，其特征在于，包括如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2所示序列。2.编码基因，其特征在于，表达权利要求1所述的蛋白融合标签。3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于，包括如SEQIDNO.3或SEQIDNO.4所示序列。4.重组载体，其特征在于，包括权利要求2或3所述的编码基因。5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，包括表达载体pET‑28b(+)。6.重组菌，其特征在于，包括权利要求1所述的蛋白融合标签或权利要求4或5所述的重组载体。7.转基因细胞系，其特征在于，包括权利要求1所述的蛋白融合标签或权利要求4或5所述的重组载体或权利要求6所述的重组菌。8.表达盒，其特征在于，包括权利要求1所述的蛋白融合标签或权利要求4或5所述的重组载体或权利要求6所述的重组菌或权利要求7所述的转基因细胞系。9.权利要求1所述的蛋白融合标签在构建融合蛋白表达系统中的应用。2CN115948359A说明书1/6页蛋白融合标签及其应用技术领域[0001]本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种蛋白融合标签及其应用。背景技术[0002]大肠杆菌表达系统是目前最常用的重组蛋白表达系统，广泛应用于医药、工业以及分子生物学等领域。在医药领域中，大肠杆菌用于小型重组抗体片段(scFv、Fab和双特异性抗体)的生产；在工业领域中，主要用于生产天冬氨酸酶、过氧化物酶等工业酶；在分子生物学领域中，用于制备酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒等。大肠杆菌作为原核生物，具有营养要求简单，传代时间短，遗传操作简单等优点，因此利用大肠杆菌表达系统用于表达外源蛋白时，其生产成本较低，且能有效表达外源蛋白。[0003]但并不是每个外源基因都能在大肠杆菌中有效地表达，原核表达系统在表达异源蛋白时也有缺陷，如：密码子偏好导致一些稀有密码子多的基因在原核宿主中不表达；外源蛋白在细胞中容易被酶解；蛋白质的错误折叠导致外源蛋白以无生物活性的包涵体形式在细胞质内聚集等。而使用蛋白融合标签帮助外源基因表达，是目前解决包涵体问题的主要方案。目前，常见融合标签有：麦芽糖结合蛋白(MBP)、谷胱甘肽转移酶(GST)和小分子泛素修饰蛋白(SUMO)等；不同融合标签都有优点，但也有一定局限性，没有一种通用的融合标签能解决所有蛋白的可溶性问题。[0004]综上所述，寻找一种新的、更有效的融合标签帮助外源蛋白的大量表达和提高溶解度是有必要的。发明内容[0005]针对以上问题，本发明目的之一在于提供一种蛋白融合标签，可以提高目的蛋白的表达和溶解度，而且不影响目的蛋白的活性。[0006]为了达到上述目的，可以采用以下方案：[0007]本发明一方面提供了一种蛋白融合标签，其包括如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2所示序列。[0008]本发明另一方面提供了一种编码基因，其表达上述的蛋白融合标签。[0009]本发明再一方面提供了一种重组载体，其包括上述的编码基因。[0010]本发明再一方面提供了一种重组菌，其包括上述的蛋白融合标签或上述的重组载体。[0011]本发明再一方面提供了一种转基因细胞系，其包括上述的蛋白融合标签或上述的重组载体或上述的重组菌。[0012]本发明再一方面提供了一种表达盒，其包括上述的蛋白融合标签或上述的重组载体或上述的重组菌或上述的转基因细胞系。[0013]本发明再一方面提供了一种上述的蛋白融合标签在构建融合蛋白表达系统中的应用。3CN115948359A说明书2/6页[0014]本发明有益效果至少包括：本发明提供