调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因及应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115976043A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202211208297.1A01H5/00(2018.01)(22)申请日2022.09.30A01H5/10(2018.01)A01H6/20(2018.01)(71)申请人中国农业科学院郑州果树研究所地址450000河南省郑州市管城回族区南曹乡安徐庄(72)发明人王力荣王君秀李勇曹珂朱更瑞王新卫陈昌文方伟超吴金龙(74)专利代理机构郑州中鼎万策专利代理事务所(普通合伙)41179专利代理师徐文婷(51)Int.Cl.C12N15/29(2006.01)C07K14/415(2006.01)C12N15/84(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表（电子公布）附图2页(54)发明名称调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因及应用(57)摘要本发明公开了调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因及应用，所述PpWRKY4基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。所述PpWRKY4基因编码的氨基酸序列如SEQIDNO.2。本发明以蚜虫接种前后的抗蚜桃品种叶片为材料进行转录组测序，首次发现PpWRKY4基因对于蚜虫抗性的影响。同时本发明通过将PpWRKY4过表达载体转化到拟南芥中进行验证，结果证明过表达PpWRKY4基因的拟南芥上蚜虫数目明显少于野生型。本发明为培育抗蚜桃品种奠定了基础。CN115976043ACN115976043A权利要求书1/1页1.调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因，其特征在于，所述PpWRKY4基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.根据权利要求1所述的PpWRKY4基因，其特征在于，所述PpWRKY4基因为完整的编码547个氨基酸的ORF。3.根据权利要求2所述的PpWRKY4基因，其特征在于，所述PpWRKY4基因编码的氨基酸序列如SEQIDNO.2。4.PpWRKY4基因在调控桃抗蚜性中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在蚜虫侵染后，所述PpWRKY4基因在桃叶片中被诱导表达。6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，具体方法为：所述PpWRKY4基因与载体pRI101‑AN正向连接后得到pRI101‑PpWRKY4重组表达载体，将所述pRI101‑PpWRKY4重组表达载体转化到DH5α大肠杆菌中，筛选阳性菌提取质粒，将测序验证过表达载体中的PpWRKY4基因序列正确的质粒转化农杆菌菌株GV3101，制备侵染液，将拟南芥植株的地上部位倒置于侵染液中，暗培养过夜，即可正常栽培管理。2CN115976043A说明书1/5页调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因及应用技术领域[0001]本发明涉及调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因及应用，属于农业生物技术领域。背景技术[0002]桃蚜(MyzuspersicaeSülzer)，又叫桃赤蚜、腻虫、烟蚜、油汉，属同翅目，蚜科。桃蚜分布范围广，在朝鲜、日本、印度尼西亚、印度以及北美、欧洲、非洲等地均有发生，是世界上分布最广的蚜虫之一，在我国桃主要产区均有分布。桃蚜寄主范围广，可以在50多科400多种植物上取食，主要包括桃、李等蔷薇科植物，油菜等十字花科植物，烟草、马铃薯等茄科植物。并且，桃蚜的传毒能力强，可传播115种植物病毒，占整个蚜虫传播的植物病毒的67.7％。桃蚜会对作物产生严重危害。受桃蚜侵食后的植物幼叶向反面横卷或不规则卷曲，阻碍叶片的营养吸收，使叶片营养恶化，甚至黄落。蚜虫排泄在叶片上的蜜露易诱发霉污病，干扰植物的光合作用，严重影响作物的产量和品质。桃蚜的繁殖力很强，世代重叠现象突出，孤雌繁殖，适应性强，是最难防治的害虫之一。[0003]目前，对于桃蚜的防治主要依赖于杀虫剂。但由于近年来烟碱类杀虫剂的广泛使用，桃蚜已经对其产生抗药性，防治难度增加；另外，广谱型杀虫剂的大量使用对授粉昆虫和天敌昆虫也产生严重危害，并对果园的生态环境造成破坏。因此挖掘抗性资源的抗蚜基因、培育抗桃蚜新品种，是桃资源和育种研究工作的重要环节。本发明利用抗蚜资源挖掘到一个参与桃抗蚜过程的WRKY基因，为培育抗蚜桃品种奠定了基础。发明内容[0004]针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一个首次从桃中获得的PpWRKY4基因，该基因具有调控抗蚜的功能。[0005]为了实现上述目的，本发明的技术方案之一是提供：[0006]调控桃抗蚜性的PpWRKY4基因，所述PpWRKY4基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。[0007]所述PpWRKY4基因为完整的编码547个氨基酸的ORF。[0008]所述PpWRKY4基因编码的氨基酸序列如SEQIDNO.2。[0009]本发明的技术方案之一是提供：PpWRKY4基因在调控桃抗蚜性中的应用。[001