快速定量检测三七素的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115980233A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202211307741.5(22)申请日2022.10.25(71)申请人天津师范大学地址300387天津市西青区宾水西道393号申请人云南农业大学西南林业大学(72)发明人郑文杰季超朱书生何霞红(74)专利代理机构北京惟诚致远知识产权代理事务所(普通合伙)11536专利代理师王慧凤(51)Int.Cl.G01N30/06(2006.01)G01N30/74(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图6页(54)发明名称快速定量检测三七素的方法(57)摘要本发明公开了一种三七中三七素的快速定量检测方法，包括：用纯水提取三七样品，与乙腈配比成3：7的混合溶液，获得所述三七样品的提取液；以及采用超高效液相色谱‑二极管阵列检测器系统分析所述三七样品的提取液；所述超高效液相色谱的条件如下：流动相A：乙腈，流动相B：80mM甲酸铵；75％A，25％B等度洗脱；所述二极管矩阵检测器的采集波长为215nm。本发明的方法检测三七样本中的三七素，利用超高效液相色谱‑光电二极管矩阵检测器系统，并结合超声快速提取三七素技术，大大节省了检测时间，样品前处理时间加检测时间，共计9min，且没有衍生物的干扰，检测结果精确可靠，整体操作简单，适用于推广检测。CN115980233ACN115980233A权利要求书1/1页1.一种三七中三七素的快速定量检测方法，包括：1)将猜测三七样品加入纯水中，提取，离心后取上清液，获得三七样品的初步水提取液；2)将初步水提取液与100％的乙腈混合获得混合溶液，再经过超声处理和离心获得上清液，即为供高效液相色谱柱分析的三七样品提取溶液；3)超高效液相色谱‑二极管阵列检测器系统分析所述三七样品的提取液；其中，所述超高效液相色谱采用SyncronisHILIC1.7um×2.1×150mm色谱柱；所述超高效液相色谱的条件如下：流动相A：乙腈，流动相B：80mM甲酸铵；75％A，25％B等度洗脱；所述二极管矩阵检测器的采集波长为215nm。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.4mL/min。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的柱温为30℃。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述二极管矩阵检测器的光电分离度为1.2nm，采样速率为10pt/s。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述提取的方法为超声处理，离心的条件为10000rpm/min离心3min。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中，将初步水提取液后与100％乙腈体积比为3：7的比例混合获得混合液体。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，三七样品与纯水的混合比例为0.1g：1ml。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述离心的条件为12000rpm/min离心3min。2CN115980233A说明书1/5页快速定量检测三七素的方法技术领域[0001]本发明涉及化学分析测试领域，具体而言，涉及快速定量检测三七素的方法。背景技术[0002]三七[Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen]为五加科人参属多年生草本植物，味甘、微苦、性温，已有几百年的历史，是我国特有的名贵中药材，同时也被纳入到保健食品管理的中药品种当中，具有散瘀止血，消肿定痛、抗炎抗氧化、预防心血管疾病和保护肝脏等功效(国家药典委员会,2015)。三七不仅在中医药行业，还在食品和日化品产业中的应用发展迅猛，含有三七的中成药种类繁多，如三七注射液、云南白药、复方丹参滴丸、血塞通注射液等中成药，也逐渐被牙膏、护肤品等日化品所使用。据统计，全国以三七为原料的中成药品种有540多种，药品批号3600多个，涉及制药企业1350多家(刘立红etal.,2017)。三七素是三七起止血作用的主要活性成分，此外三七素的主要功效还包括抗炎(Yangetal.,2017)抗氧化(Huangetal.,2020)、抑制破骨细胞的形成(Cangetal.,2021)、减轻糖尿病肾病损伤(Jieetal.,2017)等。然而三七品质定量检测技术比较滞后，主流上仍以《药典》2020版中通过液相色谱法对皂苷定量检测来分析其品质，并没有对三七素含量标准进行规定。近些年来，有学者对三七素展开研究，但由于三七素的特点，常用的衍生化方法的样品前处理操作繁琐、耗时，且不能排除衍生物的干扰，大大制约了三七素的检测效率，不适用于大批量样品检测和市场推广。发明内容[0003]本发明旨在建立一种无需衍生化检测三七中三七素的液相色谱方法，适用于三七多样化产品的检测，不