富硒富锌蝉花的栽培方法及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115992053A(43)申请公布日2023.04.21(21)申请号202111217719.7A23L31/00(2016.01)(22)申请日2021.10.19A23K10/18(2016.01)A61K36/062(2006.01)(83)生物保藏信息C12R1/645(2006.01)CGMCCNo.214532021.01.22(71)申请人中国农业大学地址100193北京市海淀区圆明园西路2号(72)发明人郭岩彬丁惠张洒洒赵桂慎胡婷程光发薛银婷(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002专利代理师黄爽(51)Int.Cl.C12N1/14(2006.01)A01G18/00(2018.01)权利要求书2页说明书20页A01G18/20(2018.01)序列表1页附图19页(54)发明名称富硒富锌蝉花的栽培方法及其应用(57)摘要本发明提供一种富硒富锌蝉花的栽培方法及其应用。本发明还提供一株对硒具有较高耐受能力的蝉花M8。富硒富锌蝉花的栽培方法包括菌种活化、种子液制备和富硒富锌蝉花栽培等步骤。利用本方法栽培得到的蝉花子实体同时富集硒、锌两种元素，并保持了原有的活性物质，从而获得优质的富硒富锌蝉花子实体。特别是栽培培养基中添加了亚硒酸钠和硫酸锌，以及添加了亚硒酸钠和乙二胺四乙酸二钠锌，对应的蝉花子实体硒含量最高，锌含量较高，生物量较高，腺苷含量最高，虫草酸含量最高，提升了蝉花的营养和药用价值。CN115992053ACN115992053A权利要求书1/2页1.蝉棒束孢(Isariacicadae)M8，其特征在于，保藏编号为CGMCCNo.21453。2.含有权利要求1所述蝉棒束孢M8的菌剂或组合物。3.权利要求1所述蝉棒束孢M8在制备富硒和/或富锌蝉花中的应用。4.富硒富锌蝉花的栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：A、菌种活化；B、种子液的制备；C、富硒富锌蝉花的栽培；步骤C使用小麦培养基进行蝉花的栽培，且小麦培养基中添加有无机硒盐和/或纳米硒以及无机锌盐和/或有机锌盐；所述小麦培养基的制作方法包括：将小麦与营养液按1:1～1.5(g/mL)的比例混合，于105‑121℃高压灭菌20‑30min；所述营养液的配制如下：将糖20g、KH2PO42g和MgSO4·7H2O1g混合，加水定容至1000mL；所述糖选自葡萄糖、蔗糖或麦芽糖中的至少一种。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述无机硒盐包括硒酸盐和/或亚硒酸盐；所述纳米硒包括生物合成的纳米硒和/或化学合成的纳米硒；所述无机锌盐包括硫酸锌；所述有机锌盐包括乙二胺四乙酸二钠锌。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，小麦培养基中硒酸盐的浓度为0.5‑100mg/kg；和/或小麦培养基中亚硒酸盐的浓度为0.5‑100mg/kg；和/或小麦培养基中硫酸锌的浓度为100mg/kg；和/或小麦培养基中乙二胺四乙酸二钠锌的浓度为100mg/kg。7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤A包括：将蝉花接种至改良PDA培养基，在20‑25℃恒温培养箱中培养18‑25天，至大量产孢；所述改良PDA培养基的配制如下：将马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂17g、蛋白胨3g、KH2PO42g、MgSO4·7H2O1g和VB30mg混合，加水定容至1000mL，于105‑121℃高压灭菌20‑30min。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤B包括：取直径5‑9mm的活化蝉花菌饼接种至盛有200mL改良PD培养基的500mL培养瓶中进行摇培，摇培条件为：21℃，转速180r/min，摇培3天，得到种子液；所述改良PD培养基的配制如下：将马铃薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨3g、KH2PO42g、MgSO4·7H2O1g和VB30mg混合，加水定容至1000mL，于105‑121℃高压灭菌20‑30min。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，将液体种子液稀释3‑7倍，向盛有小麦培养基的栽培瓶中加入稀释菌液5mL，每个栽培瓶中盛有20‑30g小麦培养基；接完菌的栽培瓶转移至21℃恒温栽培室，相对湿度80‑90％，避光培养4天后，进行12小时白光、12小时红光交替的光照培养35天，至子实体成熟，顶部产孢即可采收；优选地，所述蝉花为权利要求1所述蝉棒束孢M8。10.按照权利要求4‑9任一项所述方法获得的富硒富锌蝉花的以下任一应用：1)用于保健品领域；2)用于食品领域；3)用于饲料领域；2CN115992053A权利要求书2/2页4)用于制备药物或组合物。3CN115992053A说明书1/20页富硒富锌蝉花的栽培方法及其应用技术领域[0001]本发明涉及虫草栽培技术，具体地说，涉及一种