闽楠PbbHLH30基因，其编码的蛋白和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116023459A(43)申请公布日2023.04.28(21)申请号202310163837.7A01H6/82(2018.01)(22)申请日2023.02.09C12R1/01(2006.01)(71)申请人浙江农林大学地址311300浙江省杭州市临安市武肃街666号(72)发明人张俊红王立张毓婷童再康(74)专利代理机构北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙)11498专利代理师王加岭杨静(51)Int.Cl.C07K14/415(2006.01)C12N15/29(2006.01)C12N15/84(2006.01)C12N1/21(2006.01)A01H5/00(2018.01)权利要求书1页说明书9页序列表（电子公布）附图2页(54)发明名称闽楠PbbHLH30基因，其编码的蛋白和应用(57)摘要本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及闽楠PbbHLH30基因，其编码的蛋白和应用。该基因的cDNA序列全长如SEQIDNo.1所示，其编码蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。通过根癌农杆菌介导法转化烟草，获得过表达烟草植株。并对其进行分子检测，对基因过表达的烟草进行花青素提取和PbbHLH30基因的表达分析，结果表明PbbHLH30过表达烟草中花青素含量显著高于对照烟草叶片花青素含量。CN116023459ACN116023459A权利要求书1/1页1.闽楠PbbHLH30蛋白，其为：1)由SEQIDNo.2所示的氨基酸组成的蛋白质；或2)在SEQIDNo.2所示的氨基酸序列中经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性的由1)衍生的蛋白质。2.编码权利要求1所述的闽楠PbbHLH30蛋白的基因。3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，序列如SEQIDNo.1所示。4.含有权利要求2或3所述基因的载体。5.含有权利要求4所述载体的宿主细胞。6.含有权利要求2或3所述基因的工程菌。7.权利要求2或3所述基因在提高植物积累花青素中的用途。8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，将所述基因转入植物基因组中，并在转基因植物中超量表达，提高植物积累花青素。9.一种提高植物积累花青素的方法，采用农杆菌介导的方法，将含有权利要求2或3所述基因的载体转入植物基因组中，筛选获得转基因植株。10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的转基因植株过表达所述基因。2CN116023459A说明书1/9页闽楠PbbHLH30基因，其编码的蛋白和应用技术领域[0001]本发明属于植物生物技术领域，涉及闽楠PbbHLH30基因，其编码的蛋白和应用。背景技术[0002]闽楠(Phoebebournei)属樟科(Lauraceae)楠属植物，是中国的一种本土珍稀阔叶树种，为“金丝楠木”原种植物之一，由于其叶色多样性和直立树干，具有很高观赏价值。闽楠还具有极高的商业价值，其木材因其著名的耐腐性和美丽纹理而被用于制作高贵的建筑、家具和雕塑，其提取物含有多种活性物质，例如花青素和木脂素等。[0003]有研究表明，花青素不仅为植物提供丰富多样的颜色，还可以减少植物受到昆虫、病原体、紫外线(UV)辐射和非生物胁迫的伤害。还有证据表明，植物中提取的花青素有益于人体健康，作为抗癌剂和抗氧化剂，具有很强的抗氧化、抗癌能力、保护神经、降血脂和降血糖、预防多种慢性疾病并用于治疗相关疾病。[0004]花青素的抗癌作用已被科研工作者进行广泛研究，花青素通过调节细胞的碳水化合物、脂质和蛋白质代谢及炎症、氧化应激和凋亡信号通路等起到抗癌作用。例如，葡萄中花青素通过抑制IκBɑ磷酸化而阻止肿瘤坏死因子ɑ诱导NF‑κB被激活，以计量依赖的方式抵‑抗人结肠癌细胞的侵袭。花青素可以清除活性氧(ROS)和活性氮(RNS)，如超氧阴离子(O2)、过氧化物自由基(RCOO)、过氧化氢、羟基自由基(OH)和过氧亚硝酸阴离子(ONOO‑)等。例如从越橘中分离得到的花青素具有很强的清除超氧阴离子和过氧亚硝酸阴离子的能力。患有代谢综合症的人每天摄入320mg花青素能够显著抑制人体中NF‑κB通路相关促炎症因子基因的表达和增强PPAR‑γ基因表达降低患炎症风险。树莓中提取的矢车菊素‑3‑O‑葡萄糖苷可以抑制脂多糖诱导小鼠骨髓巨噬细胞的促炎症因子IL‑6、TNF‑α、IL‑1B、MCP‑1和Inos的产生。还有研究表明，摄取花青素能保护中枢神经系统，花青素能够跨过血脑屏障到达脑部多个功能区，降低大脑功能紊乱风险，预防脑缺血和阿尔兹海默症、帕金森等神经退行疾病。花青素提取物还可以降低血清和尿液中的糖含量，并且能够防止氧自由基的产生和降低脂质氧化。[0005]花青素是常见的黄酮类化合物，而花青素生物合成调控的核心转录因子之一