一种从杜仲叶中提取杜仲胶的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102276849A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102276849A(43)申请公布日2011.12.14(21)申请号201110105967.2(22)申请日2011.04.27(71)申请人武汉普赛特膜技术循环利用有限公司地址430068湖北省武汉市武昌湖北工业大学校内北区膜技术研究所(72)发明人万端极刘冬成徐国念吴正奇李丹刘芸芳魏旋杨青李猷(51)Int.Cl.C08J3/00(2006.01)C08L7/00(2006.01)C12S3/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页附图1页(54)发明名称一种从杜仲叶中提取杜仲胶的方法(57)摘要本发明涉及一种天然产物提取的方法，尤其涉及一种利用生物法从杜仲叶中提取杜仲胶的方法。包括以下工艺步骤：第一步，杜仲叶的预处理，包括磨浆和酶解。第二步，氮源的制备，包括膜过滤、膜浓缩和树脂吸附，并将膜过滤浓缩液和柱下液干燥做为氮源备用。第三步：杜仲胶的提取，包括接种杜仲霉菌-16固态发酵，并将发酵产物固液分离，液体干燥做为碳源备用，粗胶经轻洗、精制得到精胶。此法提胶生产效率高、生产成本低、并可联产绿原酸增加收益。CN10276849ACCNN110227684902276852A权利要求书1/1页1.一种利用生物法从杜仲叶中提取杜仲胶的方法，包括以下工艺步骤：(1)预处理：杜仲干叶加入2倍水(质量倍数，下同)磨浆，再加入6倍水和5‰(以干叶质量计，下同)蛋白酶水解，其中pH为6，温度为50～60℃，水解1～2h，固液分离。(2)氮源的制备：酶解液通过微滤膜过滤、纳滤膜浓缩、树脂吸附工序，将微滤膜浓缩液和树脂吸附柱下液干燥得蛋白及多肽混合物。将树脂洗脱可得绿原酸。(3)杜仲胶的提取：将杜仲霉菌-16接种于离心所得渣中，在发酵池进行固态发酵，固液比为1∶2.5(质量比，下同)，发酵完成后离心，上清液干燥，主要成分为多糖和可溶性物质。杜仲粗胶经轻洗、精制得到精胶。2.根据权利要求1所述的一种利用生物法从杜仲叶中提取杜仲胶的方法，其特征在于步骤(2)中的蛋白及多肽混合物部分回用，为固态发酵提供氮源。3.根据权利要求1所述的一种利用生物法从杜仲叶中提取杜仲胶的方法，其特征在于中杜仲霉菌-16接种量1～1.5％，发酵温度35～40℃，发酵时间7d。4.根据权利要求1所述的一种利用生物法从杜仲叶中提取杜仲胶的方法，其特征在于步骤(3)中多糖和可溶性物质的混合物部分回用，为固态发酵提供碳源。5.根据权利要求1所述的一种利用生物法从杜仲叶中提取杜仲胶的方法，其特征在于发酵初始时，按质量比3∶1添加碳源和氮源。2CCNN110227684902276852A说明书1/3页一种从杜仲叶中提取杜仲胶的方法技术领域[0001]本发明涉及一种天然产物提取的方法，尤其涉及一种利用生物法从杜仲叶中提取杜仲胶的方法。背景技术[0002]杜仲胶是一种白色丝状物质，化学成分是反-1，4-聚异戊二烯，具有橡胶-塑料二重性，被称为第二种天然胶，是世界上适应范围最广、发展潜力最大的优质胶源，是天然橡胶不二的替代品，可从根本上解决我国天然橡胶资源匮乏的问题。目前，我国杜仲栽培面积约35万公顷，占世界杜仲种植面积的99％以上，但国内规模最大的杜仲胶生产企业目前的年产量也不过几十吨，远不能满足市场的需求，这些就使得用杜仲叶生产杜仲胶工艺的开发成为热点。[0003]在本发明之前，已有一些关于杜仲胶的专利。如中国专利公告号1054985杜仲胶综合提取方法通过发酵-蒸煮-轻洗-干燥-溶剂提取-去溶剂提取粗胶-净化这一工艺路线从杜仲叶中提取杜仲胶。该法虽然可以避免机械法造成的胶流失，但是该法自然发酵所需时间长(2～3个月)，发酵不彻底，发酵底物处理不当会造成环境污染；而且在自然发酵之前不对原液进行预处理，照成物料处理量大，增加基建等生产成本。中国专利公告号101157827从杜仲叶和皮中提取长丝杜仲胶的方法公开了如下工艺：杜仲叶、杜仲皮裁剪-氢氧化钠溶液溶解杜仲叶角质层和木质素-纤维素酶水解-石油醚浸提-过滤-冷冻。该法虽然缩短了提取时间，但是杜仲叶中纤维和杜仲胶是以夹板结构的形式存在的，是纤维层-胶层-纤维层-胶层-纤维层的五层结构。虽然氢氧化钠浸泡可溶解角质层和木质素使纤维素层暴露，但是胶层间的纤维层无法与氢氧化钠溶液接触，使得后续的酶解工序水解不彻底，杜仲胶提取率不高。中国专利申请号201010252992.9一种从杜仲叶林萌生枝皮中提取杜仲胶的方法公开了一种从杜仲老林中筛选菌种发酵杜仲皮，再通过冲胶、精制得到精胶的工艺路线。该工艺虽然可以提高杜仲胶得率，但是该工艺中的起爆剂需要加入外来物种(玉米粉)，且发酵时间较长。在冲胶工序中，采用高压水枪冲洗会造成杜仲胶流速严重