一种从杜仲叶快速纯化桃叶珊瑚甙的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102603829A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102603829A(43)申请公布日2012.07.25(21)申请号201210041035.0(22)申请日2012.02.22(71)申请人向华地址410128湖南省长沙市芙蓉区农大路1号湖南农业大学兴湘楼405室(72)发明人向华唐忠海(51)Int.Cl.C07H17/04(2006.01)C07H1/08(2006.01)权利要求书权利要求书1页1页说明书说明书33页页附图附图11页(54)发明名称一种从杜仲叶快速纯化桃叶珊瑚甙的方法(57)摘要本发明提供了一种从中提取高纯度桃叶珊瑚甙的方法，大大地提高桃叶珊瑚甙得率和纯度。提出了一整套从杜仲叶分离提取得到高纯度的桃叶珊瑚甙，采用杀青处理新鲜杜仲叶，萃取，大孔吸附树脂层析，浓缩，结晶，得到桃叶珊瑚甙纯品。整个分离过程中对环境条件要求不高，分离时间较短，纯度高。分离材料易得便宜，分离操作过程简单，易控制，采用结晶和重结晶，纯化效率高，降低对环境污染的风险，同时又节约了资源。CN1026389ACN102603829A权利要求书1/1页1.本发明提供一种从杜仲叶中快速纯化桃叶珊瑚甙的方法，步骤包括：(1)将新鲜杜仲叶采用茶叶滚筒杀青机进行杀青2—3分钟，立即进行绞碎；(2)将杜仲叶与80%乙醇溶液进行混合提取，加热至40℃提取90min；(3)过滤除渣后滤液中加入适量抗氧化剂在50℃进行真空浓缩至原有体积的1/10-1/15；(4)将浓缩液用2倍体积的石油醚进行萃取，取水相；(5)将水相用KLFC－150大孔树脂吸附，并用乙醇溶液进行洗脱，得到洗脱液；(6)将洗脱液再经浓缩至原有体积的1/3-1/8，室温过夜结晶得到桃叶珊瑚甙粗品；(7)加入70%乙醇进行加热溶解，然后加入水调节乙醇终浓度为30-40%，室温过夜再结晶，得桃叶珊瑚甙纯品。2.根据权利要求1的方法，其中步骤2中所述加入80%乙醇溶液的量，按体积(V)/杜仲叶重量(kg)比为2-4:1。3.根据权利要求2的方法，其中步骤3中所述过滤过程是纱布过滤、陶瓷膜过滤，其中，优选是三层纱布过滤2次、陶瓷膜过滤1次；加入适量抗氧化剂是抗坏血酸，滤液体积与加入抗坏血酸的重量比（V/g）为25—50：8。4.根据权利要求3的方法，其中步骤5中乙醇溶液是用pH6.5左右的水与乙醇进行配制，其浓度为50%的乙醇溶液。5.根据权利要求3的方法，其中步骤7中乙醇溶液的终浓度为35%。2CN102603829A说明书1/3页一种从杜仲叶快速纯化桃叶珊瑚甙的方法所属技术领域：[0001]本发明属于天然产物加工领域，涉及了一种杜仲叶桃叶珊瑚甙的提取纯化方法，更具体地说是涉及了一种从杜仲叶中提取并纯化高纯度桃叶珊瑚甙的方法。背景技术[0002]桃叶珊瑚甙是一种环烯醚萜甙类化合物，为白色粉末。由于C4去甲环烯醚萜甙结构不太稳定，桃叶珊瑚甙相对稳定性较差。桃叶珊瑚甙吸湿性不是很强，在潮湿的情况下很不稳定，容易变色，而干燥品相对较稳定。光线对桃叶珊瑚甙的影响较小，而温度、氧化剂的影响较大。碱性物质对桃叶珊瑚甙的影响比酸性物质大得多。[0003]桃叶珊瑚甙的甙元及其多聚体具有抗菌作用，是一种抗菌素，其抗炎、抗菌性能与当药苦甙相同。桃叶珊瑚甙本身不具抗病毒作用，但当它与葡萄糖甙酶一起预培养后会产生明显的抗病毒作用。可刺激副交感神经中枢、加速尿酸转移和排出，利尿作用明显。能促进干细胞再生，明显抑制乙型肝炎病毒DNA的复制。另外桃叶珊瑚甙具有镇痛、清湿热、抗肿瘤等作用。[0004]桃叶珊瑚甙是杜仲中有效活性成分之一，杜仲皮、叶和种子中均含有此成分，种子中含量可高达19％～23％，是杜仲种子的苦味素物质之一。在杜仲皮和叶中桃叶珊瑚甙含量有较大区别，杜仲叶比杜仲皮含量高，由于环烯醚双键性质活泼，甙易被酶和酸水解，故甙在鲜品和干品中的含量差别也很大。[0005]温度对桃叶珊瑚甙抗氧化活性的影响很大，桃叶珊瑚甙抗氧化活性保存率随着加热时间的延长而出现不同程度的下降趋势，温度愈高保存率下降愈快。在室温条件下4h内桃叶珊瑚甙是稳定的；在高温条件下连续加热处理8h，桃叶珊瑚甙抗氧化活性损失高达70％。这可能因为桃叶珊瑚甙本身是热敏性物质，高温处理会使其发生氧化分解，产生黑色物质。100℃处理的桃叶珊瑚甙溶液在第1个小时内即已颜色变深。[0006]桃叶珊瑚甙在杜仲种子含量最高，由于杜仲种子产量少，另外杜仲种子目前主要用于热榨提取杜仲油，虽有文献报道从杜仲籽粕中提取桃叶珊瑚甙，必须采用冷榨或超临界CO2提取杜仲油后得到的杜仲籽粕，才能用于提取桃叶珊瑚甙，但是会影响杜仲油原有风味。而且目前都是采用制备色谱法进行制备高纯度桃叶珊瑚甙，严重影响了桃叶珊瑚甙的规模化生产。