迷人杜鹃的组培繁殖方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102792893A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102792893A(43)申请公布日2012.11.28(21)申请号201210306249.6(22)申请日2012.08.27(71)申请人云南农业大学地址650201云南省昆明市黑龙潭云南农业大学(72)发明人张敬丽田晓玲吴雅文赵海洲田伟张巧玲(74)专利代理机构昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙)53108代理人马晓青(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书33页页(54)发明名称迷人杜鹃的组培繁殖方法(57)摘要提供迷人杜鹃的组培快繁方法。选取迷人杜鹃的种子为外植体，经丛生芽诱导、壮苗并生根培养和试管苗移栽。培养的温度为20-23℃，湿度为30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX。使用该方法可达到一个无菌苗诱导4-5或者更多的丛生芽，生根率达77%，移栽成活率达99%以上，极大地提高了迷人杜鹃的繁殖能力，为迷人杜鹃的保存和规模化生产提供了技术支撑。CN1027983ACN102792893A权利要求书1/1页1.迷人杜鹃的组培繁殖方法，包括外植体消毒、丛生芽诱导、壮苗并生根培养、试管苗移栽步骤，其特征在于取迷人杜鹃的种子，进行丛生芽诱导、壮苗、生根培养，培养的温度为20-23℃，湿度为30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX；所述的种子萌发培养基为改良Anderson+0.1mg/LNAA，丛生芽诱导培养基为改良Anderson+2.1mg/L2-IP+0.1mg/LNAA，pH5.7，壮苗培养基为改良Anderson+0.5mg/L2-IP+0.1mg/LNAA，生根培养基为1/2改良Anderson+1mg/LNAA，其中改良Anderson培养基为NH4NO3减半。2.根据权利要求1所述的组培繁殖方法，其特征在于所述外植体消毒是迷人杜鹃种子，先用5%洗衣粉水浸泡清洗10min，再用无菌水冲洗至无泡沫，然后采用75%的酒精消毒40s，无菌水冲洗3遍后再用0.1%升汞溶液进行表面消毒6min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍。3.根据权利要求1所述的组培繁殖方法，其特征在于所述移栽是生根组培苗在培养瓶内培养45天以后，炼苗7天，再移栽于温室大棚。4.根据权利要求1所述组培繁殖方法，其特征在于所述移栽的移栽基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.4-5.7。5.根据权利要求1所述的组培繁殖方法，其特征在于所述移栽在早上8-11点，温度为18-25℃下进行。6.根据权利要求书1-5中的任意一项所述的组培繁殖方法，其特征在于取迷人杜鹃种子为外植体，用5%的洗衣粉水进行浸泡10分钟后反复冲洗3-5遍直至无泡沫，然后用75%酒精消毒40s，后用0.1%升汞溶液进行消毒6min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，将种子置于消毒后的滤纸上吸干水分，接种至诱导萌发培养基改良Anderson+0.1mg/LNAA，pH5.7，温度20-23℃，湿度30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX下培养，长出无菌苗后转接入丛芽诱导培养基改良Anderson+2.1mg/L2-IP+0.1mg/LNAA中进行增殖，待丛生芽长到2-3cm转入壮苗培养基改良Anderson+0.5mg/L2-IP+0.1mg/LNAA进行壮苗，其中改良Anderson培养基为NH4NO3减半，完成壮苗周期后将苗转入生根培养基，生根培养基为1/2改良Anderson+1mg/LNAA，45天生根培养后进行组培苗炼苗7天后，于上午8-11点移栽于基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.4-5.7，湿度50-60%的大棚内，每天早晚各喷水一次。2CN102792893A说明书1/3页迷人杜鹃的组培繁殖方法技术领域：[0001]本发明属于植物生物技术领域，具体地说，涉及杜鹃花迷人杜鹃的组织培养快繁方法。背景技术：[0002]迷人杜鹃Rhododendronagastum是云南野生杜鹃花的自然杂交种。迷人杜鹃隶属于杜鹃花科(Ericaceae)杜鹃花属(Rhododendron)常绿杜鹃亚属，常绿灌木至小乔木。迷人杜鹃的花粉红至深粉红色，花筒内有或多或少的斑点，花色鲜艳，具有较高的观赏价值，经申请人多年的研究，已证明迷人杜鹃为马缨杜鹃和大白花杜鹃的自然杂交种，见文章“NaturalhybridizationoriginofRhododendronagastum(Ericaceae)inYunnan,China:inferredfrommorphologicaland