编码玉蜀黍除草剂抗性基因的多核苷酸和使用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103146828A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103146828103146828A(43)申请公布日2013.06.12(21)申请号201310073128.6(51)Int.Cl.(22)申请日2007.03.09C12Q1/68(2006.01)G01N33/68(2006.01)(30)优先权数据60/7809462006.03.09US60/8886342007.02.07US(62)分案原申请数据200780016566.12007.03.09(71)申请人纳幕尔杜邦公司地址美国特拉华州威尔明顿(72)发明人T.丹A.D.小圭达C.B.哈策尔B.李M.E.威廉斯(74)专利代理机构中国专利代理(香港)有限公司72001代理人李波万雪松权利要求书1页权利要求书1页说明书26页说明书26页序列表39页序列表39页附图7页附图7页(54)发明名称编码玉蜀黍除草剂抗性基因的多核苷酸和使用方法(57)摘要本发明涉及编码玉蜀黍除草剂抗性基因的多核苷酸和使用方法。具体地，本发明涉及编码可以赋予针对至少一种除草剂的抗性的基因的多核苷酸序列。它进一步涉及携带包含所述多核苷酸序列的嵌合基因的植物和植物种子，所述多核苷酸序列增强或赋予针对至少一种除草剂的抗性，以及制备所述植物和种子的方法。本发明进一步提供了可以用作分子标记的序列，其依次可以用于鉴定玉米系中起因于新杂交的目的区域，并且通过避免敏感系快速且有效地选择最佳系用于育种策略。CN103146828ACN1034682ACN103146828A权利要求书1/1页1.一种测定植物中编码NSF1蛋白质的多核苷酸的存在的方法，其包含下述的至少一种：（a）从所述植物中分离核酸分子，且通过尝试扩增与编码NSF1蛋白质的多核苷酸同源的序列测定编码NSF1蛋白质的多核苷酸是否存在，或（b）从所述植物中分离核酸分子，且使用与编码NSF1蛋白质的多核苷酸同源的序列进行DNA或RNA杂交，或（c）从所述植物中分离蛋白质，且使用针对NSF1蛋白质的抗体进行蛋白质印迹，或（d）从所述植物中分离蛋白质，且使用针对NSF1蛋白质的抗体进行ELISA测定，由此测定所述植物中编码NSF1蛋白质的多核苷酸的存在。2.一种测定植物中Nsf1基因座的存在的方法，其包含下述的至少一种：（a）从所述植物中分离核酸分子，且通过尝试扩增与编码NSF1蛋白质的多核苷酸同源的序列测定Nsf1基因是否存在，或（b）从所述植物中分离核酸分子，且使用与编码NSF1蛋白质的多核苷酸同源的序列进行DNA或RNA杂交，或（c）从所述植物中分离蛋白质，且使用针对NSF1蛋白质的抗体进行蛋白质印迹，或（d）从所述植物中分离蛋白质，且使用针对NSF1蛋白质的抗体进行ELISA测定，由此测定所述植物中Nsf1基因座的存在。2CN103146828A说明书1/26页编码玉蜀黍除草剂抗性基因的多核苷酸和使用方法[0001]本申请是申请日为2007年3月9日的中国专利申请200780016566.1“编码玉蜀黍除草剂抗性基因的多核苷酸和使用方法”的分案申请。技术领域[0002]本发明涉及用于产生或增强植物中的除草剂抗性的组合物和方法。此外，本发明涉及已用本发明的组合物遗传转化的植物。背景技术[0003]在农作物的商业生产中，希望容易且快速地从农作物植物的田地中清除不需要的植物(即，“杂草”)。理想的处理将是可应用于整块田地但仅清除不需要的植物同时使农作物植物不受伤害的处理。一种这样的处理系统涉及对除草剂耐受的农作物植物的使用。当除草剂喷洒在除草剂耐受农作物植物的田地上时，农作物植物继续茁壮成长而非除草剂耐受杂草被杀死或严重损害。[0004]针对特定除草剂的农作物耐受性可以通过将基因工程改造到农作物内来赋予，所述基因编码合适的除草剂代谢酶。在一些情况下，这些酶和编码其的核酸起源于植物。在其他情况下，它们衍生自其他生物，例如微生物。参见例如，Padgette等人(1996)“Newweedcontrolopportunities：DevelopmentofsoybeanswithaRoundUPReadyTMgene”和Vasil(1996“)Phosphinothricin-resistantcrops，”2个参考文献都在Herbicide-ResistantCrops，编辑Duke(CRCPress，BocaRaton，Florida)第54-84页和第85-91页。事实上，转基因植物已进行工程改造以表达来自多种生物的多种除草剂耐受基因，包括编码大鼠细胞色素P4507A1和酵母NADPH-细胞色素P450氧化还原酶的嵌合蛋白质的基因(Shiota等人(1994)PlantP