一种百脉根的快速繁殖方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号(10)授权公告号CNCN103155858103155858B(45)授权公告日2014.07.30(21)申请号201110406224.9(56)对比文件CN1464060A,2003.12.31,(22)申请日2011.12.08CN101283673A,2008.10.15,(73)专利权人深圳市农科集团有限公司唐广立.百脉根高频再生体系的建立及兔出地址518040广东省深圳市深南大道7028血症病毒衣壳蛋白VP60基因的转化.《分子植物号时代科技大厦25楼育种》.2007,第5卷(第4期),第593-600页，专利权人深圳市农业生物技术发展有限公尤其是摘要，右栏第2-4段，左司栏第1段，右栏第2段.中国农业科学院生物技术研究所时永杰等.百脉根的组织培养与植株再(72)发明人钟妙娥何穗华侯学瑛吴燕民生.《草业科学》.1997,第14卷(第5期),第卢运明张占路姜静仪濮冶民61、64页.郑平审查员方晓云(74)专利代理机构北京法思腾知识产权代理有限公司11318代理人高宇杨小蓉(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书2页权利要求书2页说明书6页说明书6页(54)发明名称一种百脉根的快速繁殖方法(57)摘要本发明涉及一种百脉根的快速繁殖方法。本发明提供了一种百脉根的快速繁殖方法，包括以下步骤：1)消毒百脉根种子；2)将消毒并冲洗后的百脉根种子在无菌状态下置于培养皿中，在光照、潮湿环境中培养3～5天发芽；3)将步骤2)所得发芽种子转入不加激素的MS基本培养基中，室温25～27℃，光强2000lux，每天12h光照时数，培养20～25天；4)待芽长至10～12cm长度时取出，无菌条件下切断，每茎段长约1.5～2cm，带1片成熟叶片；5)将茎段转入一次性生长培养基内；6)茎段扦插好后，置于25～27℃室温，2000～3000lux、每天12h光照时数培养20～25天。本发明培养周期短，易于操作管理和应用推广，可显著降低生产成本，移栽成活率显著提高，彻底杜绝玻璃苗现象。CN103155858BCN10358BCN103155858B权利要求书1/2页1.一种百脉根的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：1）消毒百脉根种子；2）将消毒并冲洗后的百脉根种子在无菌状态下置于培养皿中，在光照、潮湿环境中培养3～5天发芽；3）将步骤2）所得发芽种子转入不加激素的MS基本培养基中，室温25～27℃，光强2000lux，每天12h光照时数，培养20～25天；4）待芽长至10～12cm长度时取出，无菌条件下切断，每茎段长1.5～2cm，至少带1片成熟叶片；5）将茎段转入一次性生长培养基内；6）茎段扦插好后，置于25～27℃室温，2000～3000lux、每天12h光照时数培养20～25天，其中，所述的一次性生长培养基配方为MS基本培养基的全营养成分、IBA0.1mg·L-1、NAA0.05mg·L-1、蔗糖30g·L-1和琼脂8g·L-1，MS基本培养基的配方为：营养成分含量mg/L大量营养元素微量营养元素有机添加物维生素2CN103155858B权利要求书2/2页其他有机添加物甘氨酸2PH值5.8。2.根据权利要求1所述的百脉根的快速繁殖方法，其特征在于，在步骤1）中，用0.1%升汞消毒百脉根种子20min后无菌水冲洗，无菌水冲洗3次，每次2分钟，期间不停振荡瓶子，将升汞残液彻底洗净。3CN103155858B说明书1/6页一种百脉根的快速繁殖方法技术领域[0001]本发明涉及植物无性繁殖技术领域，具体地，涉及一种百脉根的快速繁殖方法。背景技术[0002]百脉根LotuscornioulatusL.)别名鸟足豆，瘠地首蓿，为豆科百脉根属多年生草本植物，是一种优良的多年生牧草，也是常见的庭院观赏植物，亦是优良的蜜源植物和水土保持植物，原产于欧亚湿润温暖地区。我国的华南、西南、西北、华北等地均有分布，是我国温带亚热带地区极具发展潜力的优良牧草。过去一直沿用种子繁殖，但苗期生长缓慢，种子硬实率高。发芽率受诸多因素制约偏低，一定程度上影响了百脉根规模化种植。上世纪九十年代起，国内多家科研单位、大专院校采用组织培养方法进行百脉根的无性繁殖的研究，其繁殖程序是经愈伤组织-丛生芽-生根苗的三阶段培养体系，而通过生长茎段扦插一次性生根成苗(即不经过愈伤组织、丛生芽阶段，直接生根成苗)的培养方法目前未见报道。[0003]现有的培养方法是，通过愈伤组织→丛生芽或不定芽→生根培养的三步培养法。该法不仅培养周期长，生长速度慢，费时费工费材料，并且难以规模化、工厂化生产。长期以来，国内多家科研单位和大专院校都在摸索百脉根一次性生根成苗及规模化