一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法与质量检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105456333A(43)申请公布日2016.04.06(21)申请号201510382105.2(22)申请日2015.07.03(71)申请人普正药业股份有限公司地址343000江西省吉安市井冈山经济技术开发区(72)发明人周朝忠肖军平吴永忠陈梁杜剑松(74)专利代理机构南昌佳诚专利事务所36117代理人闵蓉张文宣(51)Int.Cl.A61K36/46(2006.01)G01N30/88(2006.01)权利要求书1页说明书2页(54)发明名称一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法与质量检测方法(57)摘要一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法与质量检测方法，涉及天然药物化学成分分离纯化技术。以杜仲叶为原料，粉碎后超声提取得上清液；后依次用水和乙醇洗脱除杂。采用HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量。本发明工艺简单，能耗低，得到提取物中总黄酮含量高，具有较好的经济效益和社会效益。检测相对方便，质量易控制。CN105456333ACN105456333A权利要求书1/1页1.一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：以杜仲叶为原料，粉碎成粗粉，用8~20倍40%~95%的乙醇超声提取，每次30min~60min；收集提取液，减压回收乙醇，得浓缩液；离心，得上清液；用大孔树脂上样吸附0.5~2.0小时，依次用1~3倍水洗脱除杂，流速为每小时1~3倍水；再以2~4倍30%~95%的乙醇洗脱，洗脱速率为每小时1~4倍；收集所得洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得杜仲总黄酮提取物。2.根据权利要求1所述的一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：所述超声提取次数为1~3次。3.根据权利要求1所述的一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：所述大孔树脂选用HPD-100、HPD-400、HPD600或D101中的一种。4.一种杜仲叶总黄酮提取物的质量检测方法，其特征在于，采用HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量：a.色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以20~50:80~50的甲醇-0.1~1%乙酸水溶液为流动相；检测波长为256nm；流速：0.8ml/min~1.0ml/min；柱温：25℃~35℃；理论塔板数均不低于2000；b.对照品溶液的制备：取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品和槲皮素对照品适量，精密称定，置于量瓶中，用流动相超声处理，使溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，制成芦丁和槲皮素的混合对照溶液，摇匀，即得；c.供试品溶液制备：取上述制备得到的杜仲总黄酮提取物适量，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相超声溶解；d.测定：分别精密吸取对照品和供试品溶液5~15ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。2CN105456333A说明书1/2页一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法与质量检测方法技术领域[0001]本发明涉及天然药物化学成分分离纯化技术，具体属于杜仲叶中总黄酮的制备工艺及其质量检测方法。背景技术[0002]杜仲的别名丝棉树、丝棉皮、玉丝皮。在植物分类学上属杜仲科杜仲属，其皮叶同为中药品种，收载于中国药典2010年版一部，具有补肝肾、强筋骨的作用。由于杜仲皮一般需生长多年，方可采收，周期长，资源相对紧缺。而杜仲叶的资源相对丰富、易得，近代研究证实了杜仲叶与杜仲皮有相同的有效成分和药理作用。杜仲叶中含有多种黄酮类物质，国内有关制药企业常把杜仲叶制备成杜仲浸膏，因此，需要有一种能有效检测杜仲浸膏质量的检测方法。发明内容[0003]本发明的目的是针对上面所述缺陷，提供一种工艺简单、能耗低且提取物中总黄酮含量高的杜仲叶总黄酮提取物的制备方法。[0004]本发明的另一目的是提供一种杜仲叶总黄酮提取物的质量检测方法。[0005]本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的。[0006]一种杜仲叶总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：以杜仲叶为原料，粉碎成粗粉，用8~20倍40%~95%的乙醇超声提取，提取1~3次，每次30min~60min；收集提取液，减压回收乙醇，得浓缩液；离心，得上清液；选用HPD-100、HPD-400、HPD600或D101大孔树脂，上样，上样吸附0.5~2.0小时，依次用1~3倍水洗脱除杂，流速为每小时1~3倍水；再以2~4倍30%~95%的乙醇洗脱，洗脱速率为每小时1~4倍；收集所得洗脱液，洗脱液浓缩干燥，得杜仲总黄酮提取物。[0007]一种杜仲叶总黄酮提取物的质量检测方法，其特征在于，采用HPLC法测定槲皮素和芦丁的含量：a.色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以20~50:80~50的甲醇-0.1~1%乙酸水溶液为流动相；检测波长为256nm；流速：0.8ml/min~1.0ml/min；柱温：25℃~35℃；理论塔板数均不低于200