一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110187032A(43)申请公布日2019.08.30(21)申请号201910507923.9(22)申请日2019.06.12(71)申请人贵州联盛药业有限公司地址563000贵州省遵义市汇川区淮河路1号(72)发明人周英张晟吕文俊(74)专利代理机构成都市鼎宏恒业知识产权代理事务所(特殊普通合伙)51248代理人吴锦德(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法(57)摘要本发明公开了一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，包括有以下步骤：步骤1）：以甲醇溶液为溶剂制备松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液；步骤2）：取杜仲药材处理成絮状后，得到待测样品；步骤3）：依次以三氯甲烷和甲醇提取待测样品后用甲醇溶解，得到供试品溶液；步骤4）：采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液中松脂醇二葡萄糖苷的含量；色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为体积比为25：75的甲醇-水溶液；检测波长277nm；进样量10uL；本发明采取的技术方案解决了解决目前在测定杜仲含量时对杜仲检测方法所得到的谱图均存在色谱峰性不佳，杂峰较多的问题。CN110187032ACN110187032A权利要求书1/1页1.一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于，包括有以下步骤：步骤1）：以甲醇溶液为溶剂制备松脂醇二葡萄糖苷的对照品溶液；步骤2）：取杜仲药材处理成絮状后，得到待测样品；步骤3）：依次用杜仲胶提取液和松脂醇二葡萄糖苷提取液提取待测样品后，用甲醇溶解待测样品，得到供试品溶液；步骤4）：采用高效液相色谱法测定对照品溶液和供试品溶液中松脂醇二葡萄糖苷的含量；色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-水-磷酸（14：86:0.3）溶液；检测波长277nm；进样量10uL。2.根据权利要求1所述的一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于：步骤1）中制备对照品溶液的具体操作为：精密称取松脂醇二葡萄苷对照品，加入甲醇制成没1mL甲醇含有0.5mg的松脂醇二葡萄糖苷的溶液，即得到松脂醇二葡萄糖苷对照品溶液。3.根据权利要求1所述的一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于：步骤3）中；所述的松脂醇二葡萄糖苷提取液为甲醇；杜仲胶提取液为三氯甲烷。4.根据权利要求3所述的一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于：步骤3）包括：步骤S1：精密称定0.2g待测样品，置平底蒸馏烧瓶中，加150mL甲醇，置水浴上加热回流2.5h；步骤S2：滤过，滤液蒸干，残渣以30mL水分3次，每次10mL溶解，并转移至分液漏斗中，以三氯甲烷萃取3次，每次20mL，弃去三氯甲烷液；步骤S3：水液蒸干，以适量甲醇溶解并转移至10mL量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，即得到供试品溶液。5.根据权利要求4所述的一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于：步骤S1中，甲醇加热回流时的温度在80℃～85℃，保持微沸。6.根据权利要求1所述的一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于：步骤4）中，色谱检测的色谱柱的温度为30℃～35℃。7.根据权利要求1所述的一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于：步骤4）中，色谱柱理论塔板数按松脂醇二葡萄糖苷计算≥2000。8.根据权利要求1所述的一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法，其特征在于：步骤4）中色谱检测的洗脱方式为等度洗脱。2CN110187032A说明书1/4页一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法技术领域[0001]本发明涉及药品成份含量检测领域，具体涉及一种杜仲药材中松脂醇二葡萄糖苷含量的测定方法。背景技术[0002]杜仲为杜仲科植物杜仲的干燥树皮，又名思仙、思仲、木棉，为我国名贵滋补药材。杜仲作为中药在我国已有2000多年的药用历史，具有补肝肾、强筋骨、降血压、抗肿瘤、安胎等诸多功效，《神农本草经》将其列为上品。目前已知杜仲的主要化学成分有木质素类、环烯醚萜类、苯丙素类、黄酮类等几十种化合物，研究表明其中部分活性成分桃叶珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷、绿原酸、京尼平苷酸、京尼平苷具有抗肿瘤、降血压、抗菌、抗血栓等药理作用。杜仲药材中含有大量的杜仲胶，而杜仲胶是影响杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量测定的主要因素，目前在测定杜仲含量时，存在样品处理时间长，检测方法所得到的谱图均存在色谱峰型不佳，杂峰较多且系统适用性试验不易通过等问题。发明内容[0003]本发明的目的在