一种杜仲壮骨丸的质量检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110320311A(43)申请公布日2019.10.11(21)申请号201910545252.5(22)申请日2019.08.08(71)申请人贵阳德昌祥药业有限公司地址550201贵州省贵阳市修文县扎佐医药园A区8号(72)发明人葛秋平张仕林刘莉尚秘吴劲勇李吉爽吴周维毛松(74)专利代理机构北京联创佳为专利事务所(普通合伙)11362代理人张梅(51)Int.Cl.G01N30/90(2006.01)G01N30/02(2006.01)权利要求书4页说明书49页附图17页(54)发明名称一种杜仲壮骨丸的质量检测方法(57)摘要本发明公开了一种杜仲壮骨丸的质量检测方法。所述杜仲壮骨丸由杜仲、人参、三七、细辛、川芎、当归、秦艽、独活、白术、桑枝、木瓜、续断、附片、黄芪、防风、乌梢蛇、金铁锁、狗骨胶、石楠藤、淫羊藿、大血藤、威灵仙和肿节风。提供的质量检测方法包括鉴别方法和含量测定方法；鉴别方法包括对黄芪、淫羊藿、三七、人参或肿节风的薄层鉴别检测；含量测定方法包括对马兜铃酸I、马兜铃内酰胺-I或淫羊藿苷的含量测定。所述质量检测方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，能有效控制该产品的质量，确保药物临床药效的特点。CN110320311ACN110320311A权利要求书1/4页1.一种杜仲壮骨丸的质量检测方法，所述杜仲壮骨丸按照重量份计，由杜仲81份、人参32.4份、三七32.4份、细辛16.2份、川芎48.6份、当归48.6份、秦艽64.8份、独活48.6份、白术64.8份、桑枝81.0份、木瓜48.6份、续断48.6份、附片32.4份、黄芪81份、防风48.6份、乌梢蛇13.5份、金铁锁16.2份、狗骨胶13份、石楠藤81份、淫羊藿81份、大血藤54份、威灵仙48.6份和肿节风81份按照下述方法制备而成：根据配方将人参、细辛、乌梢蛇、金铁锁、狗骨胶、三七及部分当归、川芎、独活、秦艽、白术干燥，粉碎成细粉，得药粉备用；将杜仲、桑枝、淫羊藿、木瓜、续断、石楠藤、附片、黄芪、大血藤、防风、威灵仙、肿节风以及剩余的当归、川芎、独活、秦艽、白术加水提取，过滤，滤液浓缩成浸膏；将上述浸膏、药粉及适量辅料混匀，干燥，包衣，即得；其特征在于：所述杜仲壮骨丸的质量检测方法包括鉴别方法和含量测定方法；所述鉴别方法包括对黄芪、淫羊藿、三七、人参或肿节风的薄层鉴别检测；所述含量测定方法包括对马兜铃酸I、马兜铃内酰胺-I或淫羊藿苷的含量测定。2.根据权利要求1所述的杜仲壮骨丸的质量检测方法，其特征在于：所述黄芪的鉴别方法为：取本品40丸，研细，取7g，加乙醇40-60ml，加热回流20-40min，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚洗涤2-3次，每次20ml，弃去乙醚液，取水溶液，用水饱和的正丁醇振摇提取2-4次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水溶液洗涤2-4次，每次20ml，取正丁醇溶液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，溶液加于中性氧化铝柱100-120目、5g、内径1.5cm上，先用甲醇30-50ml洗涤，弃去洗涤液，用30-50％甲醇40-60ml洗脱，收集洗脱液至水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝7-13：2-4：0.1-0.6为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热2-5分钟，置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。3.根据权利要求1所述的杜仲壮骨丸的质量检测方法，其特征在于：所述淫羊藿的鉴别方法为：取本品40丸，研细，取7g，加乙醇40-60ml，50-70℃温浸20-40分钟，滤过，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿对照药材1g，同法制成对照药材溶液，即得；取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液；照中国药典通则0502薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各15μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水＝7-13:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％三氯化铝溶液，在100-120℃加热2-5分钟，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。4.根据权利要求1所述的杜仲壮骨丸的质量检测方法，其特征在于：所述三七、人参的鉴别方法为：取本品40丸，研细，取7g，加甲醇40-60ml，加热回流提取20-40min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10