一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112655555A(43)申请公布日2021.04.16(21)申请号202011500381.1(22)申请日2020.12.18(71)申请人武汉双螺旋生物科技有限公司地址430070湖北省武汉市洪山区珞狮南路517号明泽大厦三楼3068号(72)发明人钱兴卓王娟(74)专利代理机构北京中恒高博知识产权代理有限公司11249代理人张秋云(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01G22/63(2018.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法(57)摘要本发明公开了一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法，具体涉及种植技术领域，包括以下步骤，选取已经成熟的杜鹃兰蒴果，采摘杜鹃兰蒴果后，用流水冲洗进行表面清洁，然后置于超净工作台内。本发明通过以杜鹃兰芽体基部的球茎作为外植体，通过不定芽的诱导和无根苗的生根培养和炼苗，大大缩短了培养杜鹃兰再生植株的时间，为杜鹃兰再生植株的大规模繁殖提供了一种新途径，且这种方式培育的杜娟兰生长良好且成活率较高，在现有技术水平上都得到了显著提高，为杜鹃兰种苗的规模化和工厂化生产提供了可靠的技术保障，为杜鹃兰大规模繁殖提供了一种新途径，有效地解决了当前杜鹃兰植物资源和种苗资源短缺的问题。CN112655555ACN112655555A权利要求书1/2页1.一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、选取已经成熟的杜鹃兰蒴果，采摘杜鹃兰蒴果后，用流水冲洗进行表面清洁，然后置于超净工作台内，用75％的酒精浸泡2‑3min，并用无菌水洗3‑5次，接着再用植物消毒液浸泡5‑10min，最后用无菌水洗3‑5次，用无水滤纸吸干表面水分，再以解剖刀纵向剖开蒴果，并用力抖出杜鹃兰种子，再将抖出的杜鹃兰种子先用75％的酒精消毒15‑20s，再使用无菌水洗3‑5次，并使用植物消毒液浸泡8‑12min，最后使用无菌水洗3‑5次，用滤纸吸干表面水分；S2、然后将得到的杜鹃兰种子放入由1/2‑1MS、2.5‑4.5g/L琼脂和0.1mg/LNAA组成的一号培养基中，在温度为15‑20℃的无光照条件下诱导培养25‑30天，再将其转移到二号培养基中，在温度为22‑26℃每天光照8‑12小时和光照强度为2000‑3000lx的条件下培养40‑60天，获得基部生长有球茎的杜鹃兰芽体；S3、选取幼芽生长长度为2.0‑3.0cm的类原球茎，洗去表面培养基后，将芽簇分割成两部分，一部分是芽簇中未分化的原球茎，将其接入培养基中芽簇诱导培养基中继续诱导芽簇形成，另一部分是基部明显膨大且具有分化成苗趋势的原球茎，将其接入生根二号培养基上进行生根培养直至长出3‑5条长为2‑3cm根的健壮杜鹃兰幼苗；S4、然后将得到的杜鹃兰幼苗放入激素配比为IBA0.2‑0.4mg/L+IAA0.1‑0.3mg/L的液体中浸泡30‑60min，取出阴干表面水分以后，移栽至消毒基质中培养，每培养5‑8天喷洒一次营养液；S5、培养长大后剪下一些长枝条，并将扦插枝顶剪成平口，该剪口距腋芽约1cm，扦插枝上不留成熟叶片，将扦插口朝下放进配制好的500mg/L的吲哚丁酸中浸泡25分钟后，取出晾干后插入苗床内，并搭建拱棚进行遮阳；S6、扦插后需保证土壤湿润，当扦插枝生根，抽生新叶后一周，拆除拱棚，培养结束后，将培养基放置到温度为20‑30℃的有菌环境中培养4‑8天进行炼苗，炼苗结束后取出小苗并清洗干净后移栽到大棚的苗盘中，一周后喷施叶面肥，并定期施加适量的复合肥，进行培养当新叶长出2‑3片后，每周喷1次0.2％‑0.3％的磷酸二氢钾，以促进根系健康生长，当新叶长出5片后，每周施1次0.5％的腐熟人粪尿，当新叶长出7片后，每周施1次1％‑5％的腐熟人粪，当扦插苗大量生长时，再追肥2‑3次，每周施0.1％‑0.2％的复合肥，当扦插苗进入生长缓慢期时，每周浇施稀肥液2次，3‑6个月之后便可以移植到自然土地中进行培养。2.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述扦插口斜剪成45度，且剪口需光滑平整。3.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述培养基的pH值为5.5‑6.2。4.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述基质是由珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳组成。5.根据权利要求4所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述珍珠岩、营养土、蛭石、碎杉木皮和碎花生壳的比例为3：1：1：1：1。6.根据权利要求1所述的一种提高杜鹃兰组培苗炼苗成活率的方法，其特征在于：所述成熟的杜鹃兰蒴果是指异株异花授粉，且