一种利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114561437A(43)申请公布日2022.05.31(21)申请号202210303289.9(22)申请日2022.03.24(71)申请人中国科学院广州能源研究所地址510640广东省广州市天河区五山能源路2号(72)发明人陈新德张海荣郭海军陈雪芳熊莲(74)专利代理机构广州科粤专利商标代理有限公司44001专利代理师方燕莫瑶江(51)Int.Cl.C12P19/04(2006.01)C12R1/02(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称一种利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法(57)摘要本发明公开了一种利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法。一种利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，首先将杜仲叶，水和有机酸催化剂混合均匀，然后在80℃～180℃下水解0.5～2h，即得富含绿原酸等活性成分的杜仲水解液；然后向杜仲水解液中接种木醋杆菌种子液，木醋杆菌种子液是浓度为106‑108CFU/mL的木醋杆菌，木醋杆菌种子液和杜仲水解液的体积比为2‑2.5:97.5‑98，将装有待发酵液的容器置于培养箱中，保持温度28℃发酵，分离获得富含绿原酸的细菌纤维素。本发明制备的功能细菌纤维素是一种完全生物相容性的天然纳米级聚合物，是当下最新最高端的面膜基材，原位发酵模式可以在发酵过程中产生的细菌纤维素原位吸附杜仲活性成分，大大缩短工艺流程与时间。CN114561437ACN114561437A权利要求书1/1页1.一种利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，其特征在于，首先将10～50质量份杜仲叶，100～150质量份水和0.1～5质量份有机酸催化剂混合均匀，然后在80℃～180℃下水解0.5～2h，即得富含绿原酸等活性成分的杜仲水解液；然后向杜仲水解液中接种木醋杆菌种子液，木醋杆菌种子液是浓度为106‑108CFU/mL的木醋杆菌，木醋杆菌种子液和杜仲水解液的体积比为2‑2.5:97.5‑98，将装有待发酵液的容器置于培养箱中，保持温度28℃发酵，分离获得富含绿原酸的细菌纤维素。2.根据权利要求1所述的利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，其特征在于，所述的有机酸催化剂选自甲酸、乙酸和丙酸中的一种。3.根据权利要求1所述的利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，其特征在于，发酵方式包括动态发酵与静态发酵。4.根据权利要求3所述的利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，其特征在于，所述的静态发酵时间为12‑16天。5.根据权利要求3所述的利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，其特征在于，所述的动态发酵时间为5‑7天。6.根据权利要求1所述的利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，其特征在于，细菌纤维素的分离方法为离心或者过滤。7.根据权利要求1所述的利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法，其特征在于，木醋杆菌种子液的制备方法为：挑取木醋杆菌在醋酸杆菌琼脂平板培养基上划线，30℃、耗氧、静置培养48h，挑取所得单菌落接种至100mL醋酸杆菌肉汤培养基中，30℃、耗氧、转速为220r/min、培养48h，离心收集木醋杆菌菌体，木醋杆菌菌体用1mL质量分数0.9％的生理盐水冲洗，离心，所得菌体用杜仲水解液稀释至106‑108CFU/mL，其中醋酸杆菌琼脂平板培养基成分为葡萄糖100g、酵母浸粉10g、琼脂15g、蒸馏水1L，pH值为6.8；醋酸杆菌肉汤培养基成分为：葡萄糖100g、酵母浸粉10g、蒸馏水1L，pH值为6.8。2CN114561437A说明书1/3页一种利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法技术领域[0001]本发明涉及生物化工技术领域，尤其涉及一种利用杜仲水解液原位发酵制备功能细菌纤维素的方法。背景技术[0002]杜仲是我国特有的优质天然橡胶资源，杜仲适应性极强，广泛分布于我国亚热带到温带的28个省(区、市)。杜仲是一种高附加值的中药植物，从杜仲果、皮、叶均可提取杜仲橡胶和中药活性组分。在可供利用的杜仲资源中，杜仲皮和杜仲种子的生产周期较长，产量较低，价格较高，应用受到一定的限制。杜仲叶的生长速度较快，一年可收获三到四次，产量较大，是一种重要的可再生资源。目前，杜仲叶已经广泛用于养殖行业作为饲料添加剂。此外，有研究表明，杜仲中富含木脂素类、环烯醚萜类、三萜类、酚酸类等化学成分，对人体皮肤具有抗氧化、美白等效果(中国美容医学，2016，25：100‑104)。[0003]细菌纤维素(Bacterialcellulose)是由某些细菌合成的一类生物高分子化合物。与植物纤维素不同，细菌纤维素并非细胞壁的结构成分，而是细菌分泌到胞外的高纯度产物，其不掺杂木质