杜鹃离体培养及微芽嫁接方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114847162A(43)申请公布日2022.08.05(21)申请号202210546685.4A01G24/15(2018.01)(22)申请日2022.05.19A01G24/28(2018.01)(71)申请人福建农林大学地址350000福建省福州市仓山区上下店路15号(72)发明人郭梨锦林蔚施杰何碧珠(74)专利代理机构厦门原创专利事务所(普通合伙)35101专利代理师闫英敏(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01G2/30(2018.01)A01G17/00(2006.01)A01G22/60(2018.01)A01G24/12(2018.01)权利要求书2页说明书6页附图1页(54)发明名称杜鹃离体培养及微芽嫁接方法(57)摘要本发明公开了杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其包括对杜鹃植株进行外植体移取，然后对外植体进行芽诱导和增殖培养后，获得有效苗，继而将有效苗嫁接在无菌砧木苗上并进行培养定植，最终将培养获得的嫁接苗移栽入目标土壤中；本方案培养方法成本较低，成活率较高，同时产量有所提高且品质优良，有利于高山山地杜鹃的驯化引种。CN114847162ACN114847162A权利要求书1/2页1.一种杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于，其包括对杜鹃植株进行外植体移取，然后对外植体进行芽诱导和增殖培养后，获得有效苗，继而将有效苗嫁接在无菌砧木苗上并进行培养定植，最终将培养获得的嫁接苗移栽入目标土壤中。2.如权利要求1所述的杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于，其包括：S1、选取杜鹃植株，对其取当年生长饱满的茎段作为外植体，然后对外植体进行清洁、消毒；S2、将步骤S1处理后的外植体接种在芽诱导培养基中，然后以预设条件进行培养处理，使得外植体被诱导培养获得不定芽；S3、将诱导培养得到的不定芽的芽分切成预设长度，再将其接种于增殖培养基中以预设条件培养，获得有效苗；S4、将所选取杜鹃植株的种子进行预处理后，接种于芽诱导培养基中，然后在预设条件下培养，获得无菌砧木苗；S5、利用嫁接针将有效苗嫁接在无菌砧木苗上，获得嫁接苗；S6、按预设条件对嫁接苗进行培养，然后将培养获得的嫁接苗移栽入目标土壤中。3.如权利要求2所述的杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于，S1包括：选取杜鹃植株，然后对其取当年生长饱满茎段为外植体，用流水冲洗外植体表面尘土后，将其置于饱和漂白粉上清液中浸泡10min，再取出用自来水冲滴1～2h，双蒸水冲荡2～3次，再将其置于超净工作台内用体积分数为75％酒精消毒30s，5％次氯酸钠溶液处理10～13min，无菌水冲3～4遍，最后用消毒滤纸吸干表面水分后，作为接种备用。4.如权利要求3所述的杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于，S2包括：将步骤S1中处理后的外植体切成带腋芽长为1.5cm茎段接种于经高温高压灭菌处理后的芽诱导培养基上，使得外植体被诱导培养获得不定芽；培养条件为：调节培养室温度为23±2℃，保持光照时间12h/d，光照强度介于1000～15001x，培养时长25～30d。5.如权利要求4所述的杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于，S3包括：将S2诱导培养得到不定芽的芽分切长度为2～3cm，在将其接种于增殖培养基中培养，获得有效苗，增殖培养条件为：保持光照时间12h/d，光照强度介于1500～20001x，培养时长20～25d。6.如权利要求5所述的杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于，S4包括：将所选取杜鹃植株的种子用流水冲洗净后，置于饱和漂白粉上清液中浸泡10min，再取出用自来水冲滴0.5～1h，双蒸水冲荡2～3次，然后在超净工作台中用体积分数为75％的酒精消毒30s，5％次氯酸钠溶液处理10～13min，使用无菌水冲3～4遍，再用消毒滤纸吸干表面水分；经处理后种子被接种于已高温高压灭菌处理后的芽诱导培养基上培养，获得无菌砧木苗，培养条件为：调节培养室温度为23±2℃，保持光照时间12h/d，光照强度介于1000～15001x，培养时长25～30d。7.如权利要求6所述的杜鹃离体培养及微芽嫁接方法，其特征在于，S5包括：用嫁接针去除无菌砧木苗的真叶和生长点，但不挖出苗株，再持镊子轻用尖夹住固定砧木苗子叶节，使用嫁接针贴于其中一片子叶基部靠内侧处向另一片子叶下方斜插进0.5～0.8cm，保持斜插原状暂不拔出嫁接针，嫁接针尖端不宜刺破胚轴的表皮，将其下压至有压力感即可；再用刀片于目标子叶节下0.5cm处呈30°角斜向下方切割，切口长度为0.5～0.8cm，再从背面不对称处以相同方法切一刀，处理下胚轴呈楔形；最后拔出嫁接针，将修剪得当的有效苗紧密2CN114847162A权利要求书2/2页插入孔中，获得嫁接